针刺对早期大鼠佐剂性关节炎滑膜组织肥大细胞影响的组织病理学研究

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目的:观察针刺对早期大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)滑膜组织病理改变、肥大细胞(mastcell,MC)数量、MC脱颗粒情况、类胰蛋白酶(tryptase,TS)表达的影响,探讨滑膜组织MC与针刺干预早期大鼠AA效应的关系。   方法:46只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=1.6)、模型组(n=15)和针刺组(n=15),通过注射弗氏完全佐剂(freundscompleteadjuvant,FCA)建立AA模型。针刺组大鼠隔天针刺双侧“肾俞”(BL23)、“足三里”(ST36)、“悬钟”(GB39)穴,每次15min,共8次。干预期间,对照组和模型组按照针刺组干预时间及方法处理但不针刺。每3天测量一次大鼠的体重和足跖体积。实验第18天,取大鼠右后踝关节滑膜组织制成石蜡切片:1.根据滑膜病理5级评分法,观察和评价苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色的滑膜组织病理改变;2.通过甲苯胺蓝(toluidineblue,TB)染色法,观察并计数滑膜组织MC数及其脱颗粒情况;3.通过免疫组化(immtmo-histo chemistry,IHC)法,观察并计数TS在滑膜组织中的表达。   结果:与对照组比较,实验第3天模型组大鼠体重明显下降(P<0.05),足跖体积明显增加(P<0.001);针刺组大鼠经针刺干预后,体重明显大于模型组(P<0.05),足跖体积明显小于模型组(P<0.01)。滑膜组织HE染色和病理评分结果显示,针刺可显著改善AA大鼠滑膜组织中炎细胞浸润、滑膜细胞增生和滑膜纤维组织增生情况(P<0.001)。MC甲苯胺蓝染色结果显示,模型组大鼠滑膜组织MC数及其脱颗粒率较对照组均明显增加(P<0.001,P<0.001),而针刺可有效抑制AA大鼠滑膜组织MC数及其脱颗粒率的上升,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。滑膜组织TS免疫组化结果显示,针刺可显著抑制AA大鼠滑膜组织中上调的TS表达(P<0.01)。Spearman等级相关分析结果表明:AA大鼠滑膜组织TS阳性细胞数与MC数、MC脱颗粒率均呈明显的正相关(r=0.842,P<0.001;r=0.501,P<0.001);AA大鼠滑膜组织病理总评分与MC数、MC脱颗粒率、TS阳性细胞数也呈明显的正相关性(r=0.828,P<0.001.;r=0.646,P<0.001;r=0.847,P<0.001)。   结论:   1.针刺双侧“肾俞”、“足三里”、“悬钟”干预早期大鼠AA,具有抗炎消肿的作用。   2.滑膜组织MC数、MC脱颗粒率及TS表达可反映AA大鼠滑膜病变的程度,参与了滑膜病变的发展。   3.针刺双侧“肾俞”、“足三里”、“悬钟”可抑制AA大鼠滑膜组织MC数、MC脱颗粒率及TS表达。   4.滑膜组织MC及TS表达,参与了针刺对早期大鼠AA的抗炎消肿作用。
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