为建立转pGH/IGF-I双基因猪胎儿成纤维细胞系，保存转双基因猪的成纤维细胞以便于后续细胞水平研究，本研究采用妊娠35日龄母猪体内胎儿的躯干组织，采用胰蛋白酶消化法进行分离培养。对原代培养的细胞进行了形态学观察和波形蛋白免疫组化鉴定，同时进行了冻存复苏前后的活力检测、生长动力学分析及微生物污染检测。脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（Adipocyte Fatty Acid-binding Protein，A-FABP）是影响猪肌内脂肪含量的重要候选基因之一，以长白猪背最长肌为试验材料，采用 RT-PCR法获得A-FABP基因全长编码序列，并对其进行了比对分析及同源性比较。构建pEGFP-N1-A-FABP真核表达载体，并通过脂质体转染技术将其导入成纤维细胞中，并于48 h后进行荧光表达检测。同时应用Q-PCR法对猪不同组织（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、腿肌）中的A-FABP基因表达水平进行检测。　　本研究主要内容包括：⑴原代细胞经过胰蛋白酶消化和差速离心分离纯化出成纤维细胞，细胞呈梭形或扁平状星形，细胞生长呈旋涡状，长势良好为标准成纤维细胞形态。冻存前细胞活力为94.3%，冻存3个月后细胞复苏后活力为91.2%；细胞生长总趋势呈“S”型，经历了潜伏期、指数生长期和平台期3个阶段；免疫组学鉴定细胞波形蛋白在成纤维细胞中呈阳性；细胞的细菌、真菌、病毒和支原体检测均为阴性。结果表明本试验成功建立了转双基因猪成纤维细胞系。⑵成功克隆得到猪A-FABP基因的全长编码序列399 bp，且比对结果为100%，该序列与人、牛、羊、鸡的同源性分别为90.98%、89.97%、89.97%、73.68%，研究结果表明 A-FABP基因在动物进化中具有高度保守性。同时成功构建 pEGFP-N1-A-FABP融合表达载体，并成功瞬时转染成纤维细胞。⑶Q-PCR检测结果显示A-FABP基因在7种组织中均有表达，其中背最长肌和腿肌中A-FABP基因的表达量最高与其他组织差异极显著（P＜0.01），而脾脏和肾脏中的表达量最低相对于心脏、肝脏和肺脏差异显著（P＜0.05），而A-FABP基因在心脏、肝脏和肺脏差异不显著。表明该基因在猪不同组织的表达具有差异性。