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近年来甘蔗地下害虫的发生危害已成为制约甘蔗种植业和蔗糖业可持续发展的主要因素。由于地下害虫在土中栖息,危害时间又长,是国内外公认的难于防治的一类害虫。防治方法有农业防治、物理防治、化学防治、生物防治等。从过去国内外的研究和防治实践经验来看,在预防为主、综合防治的前提下,化学防治占主导地位。过量使用化学农药,是造成当前农业生态环境日趋恶化以及农业生产效率低下的一个重要因素。生物农药具有简便、有效、对生态和环境安全等优点,能完全或部分替代化学农药,所以在不久的将来在防治地下害虫方面,生物防治会越来越重要。近年来,真菌农药制剂的研究已成为国际上微生物农药研究的热点,以绿僵菌、白僵菌为代表的真菌生物农药在害虫生物防治中正在发挥愈来愈大的作用。本研究的目的是利用我国丰富微生物资源,分离筛选对土栖天牛有高侵染力和致病力的真菌菌株,确定其生长和产孢最适条件参数,为真菌生物制剂的研制提供基础数据。研究的主要内容包括利用根围诱导富集的方法筛选分离纯化土壤中的真菌菌株,筛选出高毒力,高生产能力,适合地下害虫及不同环境的高效、安全、环保、速效的生防真菌菌株;研究所筛选出的菌株的生物特征、确定其分类学地位对菌株的液固两相发酵的最适条件进行全面评价,并对该菌株的杀虫谱、菌株的毒力测定方法进行了初步探索。采用不同的施药方法测定了该菌株对蔗根土天牛幼虫的毒力效果和该菌株的杀虫谱,同时测定该菌株的酯酶同工酶,建立了酯酶酶型,为该菌株的毒力进行了有效的确认论文主要研究成果如下:①利用寄主-土壤诱集富集的方法,以我国南方重要土栖天牛-蔗根土天牛诱导从采自广西合浦的土壤中成功地分离得到了一株对蔗根土天牛、有高毒力、对环境安全真菌菌株CQMa117。根据菌株形态特征、生物学特性,结合菌株ITS1-5.8-ITS2 rDNA序列比对进行菌株鉴定,确定了该菌株为金龟子绿僵菌大孢变种。②在确定最适基础培养基和培养温度、pH前提下,分别从对影响菌株生长和产孢的碳源、氮源、微量元素进行了比较筛选,通过单因素和正交试验确定菌株固体培养的最佳条件为pH6、25oC为CQMa117菌株的最适产孢条件,固体培养基中以蔗糖为碳源,尿素为氮源,添加适量微量元素组合配方,可以明显促进CQMa117菌株产孢量。③在确定最佳单因素固体培养条件的基础上,分别进行固体发酵基础物料的筛选、固体发酵基础液的筛选、固体发酵营养液优化筛选。并从中选择三个能够促进菌株产孢的较优因素进行正交试验,从而确定了适合于小试和中试生产的菌株固体发酵的最佳物料配方为麦麸:玉米粉(95:5)为基础物料,添加含有0.01%Cu2+的1/2SDAY营养液。④采用毒土和点滴法测定了菌株对蔗根土天牛幼虫的毒力效果,同时测定了该菌株的杀虫谱和确定了该菌株的酯酶同工酶的酶型,为该菌株的后续工作做了充足的准备。