血液代用品通常以过期人血中纯化的人血红蛋白为原料,但多数地区血源短缺,且人血红蛋白P50较正常生理状态人血的P50低,限制了其使用。牛血红蛋白作为聚乙二醇修饰的血红蛋白主要原料能够解决血液代用品的原料短缺和P50低的问题。因此本研究中以牛血为原料,明确其制备代用品的理化性质、结构及功能,为解决原料来源问题和开发高P50的血液代用品提供数据支持。聚乙二醇修饰的血红蛋白具有较大的水化体积、较高的胶体渗透压及粘度,是血液代用品优秀的品种之一。本研究中,以聚乙二醇修饰的血红蛋白为例,制备不同原料来源的血液代用品。主要工艺过程如下:首先,聚乙二醇修饰血红蛋白的β93位巯基及巯基化的氨基制备聚乙二醇修饰的人血红蛋白(EAF-PEG-h Hb)和聚乙二醇修饰的牛血红蛋白(EAF-PEG-b Hb);然后,表征两者的物理性质、化学性质及结构,以明确EAF-PEG-b Hb在P50上的优势;最后通过小鼠重度失血性休克模型比较两者生物学效应。体外实验结果表明EAF-PEG-b Hb的P50值、胶体渗透压高于EAF-PEG-h Hb,达到实验目的,但同时也发现其自氧化速率较快。动物实验结果表明EAF-PEG-b Hb和EAF-PEG-h Hb改善平均动脉压(MAP)效果相同,但在改善失血性休克引起的酸中毒方面,聚乙二醇修饰的牛血红蛋白表现出较好的优势。这可能与其高P50和高胶体渗透压相关。