【摘 要】
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作为遗传信息的载体,DNA是基因表达的物质基础,在生物的正常生长、发育和繁殖等过程中起重要作用。DNA的分离纯化是生命科学研究的重要内容,合适的分离纯化方法是获取纯化DNA样本的关键。本论文以二硫化钼粒子（MoS2）作为固相吸附剂,基于二硫化钼粒子对蛋白质的吸附去除建立了一种快速、高效的DNA分离纯化方法。论文首先采用超声剥离法制备了二硫化钼粒子,并采用原子力显微镜、扫描电镜和Zeta电位分析等技
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作为遗传信息的载体,DNA是基因表达的物质基础,在生物的正常生长、发育和繁殖等过程中起重要作用。DNA的分离纯化是生命科学研究的重要内容,合适的分离纯化方法是获取纯化DNA样本的关键。本论文以二硫化钼粒子（MoS2）作为固相吸附剂,基于二硫化钼粒子对蛋白质的吸附去除建立了一种快速、高效的DNA分离纯化方法。论文首先采用超声剥离法制备了二硫化钼粒子,并采用原子力显微镜、扫描电镜和Zeta电位分析等技术对所得MoS2粒子进行了表征分析。考察了 MoS2粒子对蛋白质和DNA的吸附性能。在pH5.0时,5.0mg MoS2粒子可对1.0 mL、1mgmL-1蛋白质溶液达到完全吸附,而同样条件下MoS2粒子对DNA基本不产生吸附。MoS2对蛋白质的吸附在20 min达到平衡,吸附行为符合Langmuir模型,最大吸附容量为58.82 mg g-1。基于二硫化钼粒子对蛋白质和DNA吸附性能差异,提出了一种从复杂基体中分离纯化DNA的新策略。这种基于蛋白质吸附去除的DNA分离纯化方法避免了传统DNA固相萃取过程中的洗脱步骤,无需加入洗脱剂和离液剂等试剂,有效地消除了溶剂效应对DNA结构带来的影响。将所建立的分离纯化过程应用于λ-DNA模拟样品、大肠杆菌样品和鸡全血样品中DNA的分离纯化,并以纯化后的DNA为模板对500 bp λ-DNA片断、150 bp大肠杆菌基因片断和200 bp鸡全血基因片断成功进行PCR扩增,说明所该基于蛋白质吸附去除的DNA分离纯化方法所得的DNA纯度较高,能满足后续DNA分析对纯度的要求。
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