邻苯二甲酸酯类塑化剂免疫检测方法的研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YGLDY1989
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
针对邻苯二甲酸酯类(PAEs)塑化剂污染食品的问题,本论文对邻苯二甲酸酯类污染物开展了免疫检测方法的研究。  针对邻苯二甲酸二甲酯(DMP),以4-硝基邻苯二甲酸二甲酯为原料,将硝基还原为氨基,制备半抗原4-氨基邻苯二甲酸二甲酯(4-DMAP)。利用重氮化法将半抗原与牛血清蛋白(BSA)偶联制备免疫原4-DMAP-BSA。利用戊二醛法将半抗原与鸡卵白蛋白(OVA)偶联制备包被原4-DMAP-OVA。用免疫原4-DMAP-BSA共免疫4只新西兰大耳白兔制备邻苯二甲酸二甲酯抗血清,最佳抗血清是由No.2兔子产生,抗血清效价为1∶256000,1000 ng/mL邻苯二甲酸二甲酯的抑制率为85.23%。通过对方法工作条件的优化,最终确定包被量为0.03μg/well,抗体稀释度为1∶4000,封闭液为0.5%乳粉/PBS,样品稀释液为pH7.4、0.01 M的PBS。最佳工作条件下建立间接竞争ELISA,方法灵敏度IC50值为23.31±2.62 ng/mL;检出限IC15值为2.01±0.33ng/mL。该方法与其它17种邻苯二甲酸二甲酯结构类似物的交叉反应率均低于0.1%。选择白酒、蔬菜和饮料共十个样品(经GC-MS方法检测,样品中邻苯二甲酸二甲酯的含量为0 ng/g(ng/mL))进行添加回收实验,添加水平分别为100 ng/g(ng/mL)、500ng/g(ng/mL)和5000 ng/g(ng/mL),应用所建立的间接竞争ELISA方法检测,回收率在84.90%-119.17%之间,且日内和日间的变异系数(n=3)均小于15%,ELISA方法的检测结果与GC-MS的检测结果具有良好一致性(R2=0.977),说明方法具有很好的准确性,可以用于食品样品中邻苯二甲酸二甲酯的快速检测。  针对邻苯二甲酸二环己酯(DCHP),以4-氨基邻苯二甲酸为原料,通过与环己醇发生酯化反应制备半抗原4-氨基邻苯二甲酸二环己酯(4-DCHAP)。利用重氮化法制备免疫原4-DCHAP-KLH和4-DCHAP-BSA,利用戊二醛法制备免疫原4-DCHAP-BSA和包被原4-DCHAP-OVA。三种免疫原共免疫6只新西兰大耳白兔制备邻苯二甲酸二环己酯抗血清。最佳抗血清是由免疫原4-DCHAP-KLH免疫得到的No.6兔子产生,效价为1∶16000,1000 ng/mL邻苯二甲酸二环己酯的抑制率为95.88%。通过对方法工作条件的优化,最终确定包被量为0.30μg/well,抗体稀释度1∶1500。最佳工作条件下建立间接竞争ELISA,方法灵敏度IC50为211.27±10.65 ng/mL;检出限IC15为25.67±3.40 ng/mL。
其他文献
本文以‘贵妃’芒果(Mangifera indica L.cv.Guifei)和‘台农’芒果(Mangifera indica L.cv. Tainong)为试材,从控制芒果采后迅速软化后熟和冷害两方面出发,研究了1-MCP结合真空
<正>颁奖词他依托当地独有的农业特色发展实业,创建了包括7大板块在内的集团化公司,实现了黑茶产品从上游种植到成品,再到市场及文化传播的完整产业链。他计划总投资10亿元,
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
传统上甜味一直以官能品评专家来判断,目前在国内已形成一定规模,且有一定成效。但人类鉴别就带有较大的主观因素,身体状况等因素都会对品评结果产生影响。因此,采用科学有效
对于当代社会来说,发展和创新几乎成了代名词,在广告设计这一新型的行业中,对设计的思维进行创新就变得更加重要。平面广告的设计创意的主要倾诉对象就是某种特定的主题,把具
以煤为主的化石燃料燃烧排放的CO2是导致全球变暖的主要原因,燃煤CO2减排的关键是从燃烧产物中将CO2分离出来。现有的煤炭利用方式主要是以空气为氧化剂进行燃烧,生成烟气中的C
老作家梁晓声的《人世间》8月16日获得第十届茅盾文学奖,令我想起了去年6月在“梁晓声文学馆”的一段往事。  2018年6月,受江西上饶市文学艺术界联合会邀请,辽宁省散文学会的7位女作家前往上饶竹林深处的作家村,参加“庆祝改革开放40周年一一百位作家写百村、乡村旅游看上饶”活动。  一座三层与四层交错的徽派阁楼,一楼的两个门檐上分别挂着“梁晓声文学馆”“梁衡文学馆”两块牌匾,古朴的书架上,两大作家精
期刊
1rn1914年,东京一家和服店老板有了一个女儿,取名笹本恒子,名字里的“恒”字寄寓着父母对她“恒久平和”的期盼.rn少女时代的恒子,有着一大堆异想天开的梦想,母亲常说:“你是
期刊
本论文采用克隆建库法、PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)法以及纯培养的方法初步比较分析了相同销售条件下的未包装冷却牛肉与保鲜膜包装冷却牛肉中的微生物群落结构。通过采用16Sr
期刊