【摘 要】
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目的:利用谱系追踪技术研究新生小鼠心肌再生过程中心外膜的分化方向。 方法:对野生型小鼠进行心尖切除模型的构建,通过苏木精-伊红(HE)染色(n=6)观察再生情况。免疫荧光(n=6
【出 处】
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北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的:利用谱系追踪技术研究新生小鼠心肌再生过程中心外膜的分化方向。 方法:对野生型小鼠进行心尖切除模型的构建,通过苏木精-伊红(HE)染色(n=6)观察再生情况。免疫荧光(n=6)和RT-PCR(n=4)检测Wt1(Wilms Tumor Gene1)心外膜激活情况。应用Wt1特异标记小鼠(Wt1GFPCre,n=6和Wt1CreERT2;Rosa26RFP,n=6)探究激活的心外膜在心肌再生过程中的激活分化情况。 结果:野生型1天龄小鼠切除心尖(apex resection,AR)的10%-15%后,HE染色n=6)结果证实新生小鼠AR后21天心脏可以完全再生,心脏组织的Wt1免疫荧光染色(n=6)和qRT-PCR检测结果(n=4)证明新生小鼠AR后7天的切口处心外膜细胞被大量激活。Wt1GFPCre小鼠(n=6)AR后7天的GFP信号(Wt1细胞特异表达)能与上皮细胞向间充质细胞转换(EMT)的标志物(Vimentin)共定位,提示AR后激活的心外膜细胞能够发生EMT。Wt1CreERT2;Rosa26RFP谱系追踪小鼠1天龄行AR手术,7天后RFP信号(Wt1来源的细胞特异表达)在切口附近能够分别与αActinin(心肌细胞标志物)、αSMA(血管平滑肌细胞标志物)和FSP1(成纤维细胞标志物)共定位,说明AR后Wt1来源的细胞可以分化为心肌细胞、血管平滑肌细胞和成纤维细胞,进而可能参与心肌再生修复过程。 结论:在新生小鼠心肌再生过程中,心外膜细胞被激活,并可以分化为心肌细胞、血管平滑肌细胞以及成纤维细胞。这些发现为心脏医学中的心肌细胞以及血管的再生提示了可靠的细胞来源,也为临床研究心脏再生提供了新思路。
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