目的：I型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type 1，HIV—1)是获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)的病原体。现在AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和发展中国家人口死亡的首要原因。p24抗原是HIV的核心抗原，在HIV急性感染期和AIDS病程后期均可出现，其结构稳定，不易产生变异，是进行诊断和治疗的理想靶位。HIV—p24抗原的检测是AIDS早期诊断、预后判断，以及评价抗病毒的治疗效果的重要指标之一。本研究拟用大肠菌表达p24重组蛋白，获得大量纯化蛋白，为进一步制备针对HIV—1 p24的单克隆抗体、研制HIV—1诊断试剂提供实验依据和物质基础。 方法：以先期构建的gag基因表达载体为模板，PCR扩增HIV—1 p24基因，构建重组表达质粒，转化大肠杆菌建立原核表达菌株，测序鉴定正确后诱导表达带有His标签的重组蛋白。在SDS—PAGE和Western blot对重组蛋白进行鉴定后，利用磁力纯化试剂盒纯化目的蛋白。 结果：分别克隆获得了B亚型和CRF07—BC重组型HIV—1的p24基因，并成功构建了相应的重组表达工程菌。纯化获得较高纯度的目的蛋白，SDS—PAGE和Western blot证实其具有良好的特异性，可以作为后续工作的物质基础。 结论：成功构建了HIV—1B亚型和CRF07—BC重组型p24抗原的原核表达质粒，重组表达质粒可高效表达p24蛋白；纯化后获得了高纯度p24蛋白。