研究背景宫颈癌是一种发生在子宫颈上皮的恶性肿瘤,也是全球中仅次于乳腺癌的严重威胁女性健康和生命的恶性肿瘤。在我国其发病率占女性恶性肿瘤的首位,据世界卫生组织估计,我国每年新发病例13.1万,约占世界宫颈癌新发病例的28.8%。各个年龄段的女性都有可能患上子宫颈癌,然而,发病率及死亡率最高的人群集中在相对年轻的45岁至50岁的女性当中。近年来年青宫颈癌患者有明显上升趋势,保留生育功能及提高生活质量势在必行。宫颈癌好发于社会经济地位低下的妇女,可能和性卫生、HPV感染、早婚、吸烟等有关。发展中国家宫颈癌的发生率是发达国家的6倍,而且由于宫颈癌的早期筛查尚未普及,80%的患者在确诊时已经发展为浸润癌。目前对于宫颈癌早期主要采用手术治疗或放射治疗,对于中晚期以及复发、转移的宫颈癌患者多采用放射治疗结合全身化疗的治疗手段。临床发现,不同患者之间,其放化疗敏感性存在差异,导致治疗效果亦有很大不同。提高放化疗的剂量虽然在一定程度上可以提高疗效,但是不同患者的耐受性不同,并且毒副作用明显增加,严重降低患者生活质量。白花蛇舌草为茜草科一年生草本植物,具有清热解毒、活血化瘀、利尿通淋等功能。现代研究表明,白花蛇舌草主要化学成分有熊果酸、免疫多糖、乌索酸、白花蛇舌草素等,这些主要的有效成分具有增强免疫活性和抗肿瘤活性。临床观察发现白花砣舌草对宫颈癌疗效显著。Ki-67是一种核增殖标志基因,在宫颈癌等多种肿瘤高表达,这种高表达状态与肿瘤的发生、发展、复发以及对放化疗产生的抵抗性密切相关。研究目的本实验拟利用高表达Ki-67蛋白的宫颈癌细胞株Hela为研究对象,利用动物血清学的原理,研究白花蛇舌草对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及Ki-67基因的表达,探究白花蛇舌草对宫颈癌抑制作用及可能的分子生物学机制,为白花蛇舌草的进一步研究及临床应用提供实验依据，奠定理论基础。实验方法1.选用人宫颈癌Hela细胞培养24,36,72h后,MTT法检测细胞增殖,TNUEL法检测细胞的凋亡,采用RT-PCR检测Ki-67mRNA表达,免疫组化检测Ki-67蛋白表达。2.建立裸鼠人宫颈癌细胞移植模型及采用胃内灌药。取Hela细胞接种于雌性、4-6周龄BALB/C/nu裸鼠背部皮下组织内。当肿瘤生长至直径10mm时随机分为两组(n=10),对照组：荷瘤鼠不加以治疗,继续饲养到实验结束；给药组：白花蛇舌草水煎液灌胃,然后处死全部动物,取肿瘤分别称重,计算抑瘤率,肿瘤组织行免疫组化染色检测Ki-67蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。实验结果1.白花蛇舌草对宫颈癌细胞有显著的抑制作用并可诱导Hela肿瘤细胞凋亡(P<0.05),Ki-67mRNA的表达下降(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。2.白花蛇舌草对Hela细胞移植瘤生长有明显抑制作用,并可诱导Hela细胞凋亡,Ki-67蛋白的表达下降(P<0.05),并明显延长荷瘤小鼠的平均生存时间(P<0.05)。主要结论白花蛇舌草对宫颈癌Hela细胞具有明显抑制,诱导细胞凋亡,并抑制Ki-67基因的表达,这可能是其抑制肿瘤生长的分子生物学机制。白花蛇舌草清热解毒、软坚散结作用与其抑瘤增殖和诱导、促进肿瘤细胞凋亡有关。