【摘 要】
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研究人员为这两株工业用链霉菌建立了有效的转化系统,在该系统下,一般的链霉茵质粒和大肠杆菌-链霉茵穿梭质粒都可以对它们进行转化,但转化效率差别很大.将含有自身启动子的
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研究人员为这两株工业用链霉菌建立了有效的转化系统,在该系统下,一般的链霉茵质粒和大肠杆菌-链霉茵穿梭质粒都可以对它们进行转化,但转化效率差别很大.将含有自身启动子的透明颤菌血红蛋白基因(VHb)克隆到大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒载体pIJ653中构建成氧调控的表达载体pWY101和pWY102,它们可在阿维链霉菌和肉桂地链霉菌中稳定遗传,但含有pWY101和pWY102的可阿链霉菌及肉桂地链霉菌的重组于经发酵培养,在氧限条件下没有被诱导表达出透明颤菌血红蛋白-VHb,这可能是由于vhb基因自身启动子不被这两株链霉菌中的RNA聚合酶所识别,也可能是由于该链霉菌中缺少低氧条件下诱导vhb基因表达所必需的蛋白因子.经摇瓶发酵实验初步证实,VHb蛋白在氧限条件下可明显促进两个目标链霉菌重组细胞的生长和抗生素-阿维菌素及莫能菌素的合成,而且发酵液中的溶氧状况越差,VHb蛋白的作用效果越明显,这进一步证实了VHb蛋白在链霉菌发酵工业中的应用潜力.
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