井冈霉素产生菌的诱变选育及发酵条件优化

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井冈霉素是一株在井冈山地区发现的微生物菌株所产生的农用抗生素。对防治水稻纹枯病具有特效,也可用于水稻稻瘟病,小麦纹枯病的防治。此外,井冈霉素还被推广到其他作物的病菌害防治上。虽然井冈霉素发现至今已有30余年,但因其高效,低毒,对环境友好,以及尚未发现抗药性,深受广大农户的欢迎。本实验的出发菌株J1的发酵效价为20007μg/ml,为提高其效价,本研究通过紫外(UV)及硫酸二乙酯(DES)两次诱变,获得高产菌株J1-U-38-26。并对井冈霉素的发酵条件进行了优化,使井冈霉素的效价得到了较大的提高。研究结果如下:1由出发菌株J1(20007μg/ml)依次进行紫外线诱变,DES诱变。将紫外线诱变筛选出的高产菌株用于DES诱变处理。紫外线诱变获得菌株J1-U-38(22695μg/ml),DES诱变获得菌株J1-U-38-26(25874μg/ml),最终获得的目标菌株J1-U-38-26较出发菌株提高了29%。紫外线和DES的诱变贡献率分别为45.8%和54.2%。2在发酵条件优化实验中,通过单因素实验和正交实验分析研究了摇瓶产井冈霉素的最适条件,该菌的最适发酵培养基为:可溶性淀粉12%、酵母粉4%、KH2PO40.05%、NaCl 0.25%。最适发酵条件为:发酵起始pH值为7.2,接种量为8%,发酵温度为37℃,发酵时间为96h。菌株最终效价达30610μg/mL,比出发菌株提高53%。3建立并完善了以HPLC为主的效价测定方法,以保证效价测定的稳定性和可靠性
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