肉苁蓉增力有效成分及其相互作用初步研究

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荒漠肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)为传统的补肾助阳中药,简称肉苁蓉,具有增力、补肾壮阳、益精血等传统疗效,用于阳瘘,不孕,腰膝酸软,筋骨无力,肠燥便秘等症状。化学研究进展表明其主要成分苯苷类、木脂素及其苷类、环烯醚萜及其苷类、生物碱、多糖等;其中苯乙醇苷类主要针对抗疲劳、抗衰老、抗氧化、抗心肌缺血、保肝等疗效,多糖则主要应用于免疫功能;而从目前国内外研究现状来看,肉苁蓉增力作用的有效成分及其相互作用关系尚未明确,故本文针对肉苁蓉增力作用,对其主要有效成分苯乙醇苷类和多糖进行化学分析,以抗氧化、抗疲劳药效学试验初步研究两者的相互作用关系,初步阐述肉苁蓉增力有效成分及其相互作用关系。1文献综述对有关肉苁蓉的文献报道作出系统性梳理,对苯乙醇苷类与多糖类化学成分与药理研究进展进行总结,为论文实验设计提供研究背景。2苯乙醇苷类与多糖类定性分析收集不同产地肉苁蓉,制备70%醇提物(主要含苯乙醇苷类)与多糖类成分。通过定性分析苯乙醇苷类含量发现,肉苁蓉中所含苯乙醇苷类主要以松果菊苷与毛蕊花糖苷为主,且秋季采收含量普遍高于春季;野生方式生长则更有利于苯乙醇苷类的积累。多糖检测表明,不同产地肉苁蓉中多糖分子量分布也呈现出较大差异;16种产地肉苁蓉多糖水解后,葡萄糖在所测7种单糖中所占比例达到50%以上,其次为半乳糖和阿拉伯糖。3苯乙醇苷类与多糖抗氧化活性及相互作用分析体外清除自由基试验中,苯乙醇总苷IC50为14.39 μg·mL-1,70%醇提物为44.57μg·mL-1,多糖为261.3μg·mL-1;纯化后苯乙醇苷类成分抗氧化活性提高约2倍,根据isobologram分析方法,以单一化合物IC50为基础,结果表明苯乙醇苷类和多糖是以协同作用发挥抗氧化药效;含量测定中,肉苁蓉70%醇提物通过纯化分析获得苯乙醇总苷,以松果菊苷与毛蕊花糖苷计算,含量由1.9%提高至17%,苯酚硫酸法测得多糖含量为86.87%。4肉苁蓉抗氧化谱效分析药理研究已经表明,肉苁蓉增力作用与其抗氧化活性密切关联,通过建立不同产地肉苁蓉70%醇提物指纹图谱,体外抗氧化(清除DPPH)药效指标,运用偏最小二乘分析法、相关性分析、灰关联度综合分析肉苁蓉中抗氧化活性成分,结果表明,指纹图谱共匹配17个共有色谱峰,论文成功鉴定其中12个化学成分,即松果菊苷、毛蕊花糖苷及其异构体、肉苁蓉苷A及其异构体、肉苁蓉苷F、cistantubulosideC1/C2、管花苷A、syringalide A-3-α-L-rhamnopyranoside(kankanoside G)、2’-acetylacteoside、kankanoside F、kankanose。在对共有特征峰进行归属时,首次在荒漠肉苁蓉中发现salsasideC1/C2、kankanosideF、kankanoside G、kankanose4种化学成分,7种未知结构化合物,为肉苁蓉化学成分的挖掘提供数据基础。5苯乙醇苷类与多糖抗疲劳及相互作用分析肉苁蓉增力作用也与其抗疲劳作用密切相关。前期摸索发现,肉苁蓉(生药)在1、2、4 g·Kg-1剂量下均能显著延长小鼠力竭游泳时间,在最优剂量2 g·Kg-1下,将苯乙醇苷类与多糖单独给药、合并给药,探索苯乙醇苷类与多糖对疲劳状态的影响及其相互作用关系。结果表明,与对照组相比,单独给予苯乙醇苷类能够显著增加小鼠体内肝糖元含量,延长力竭游泳时间(P<0.01);单独给予多糖能够显著降低血乳酸水平(P<0.01);而在清除尿素含量一项,苯乙醇苷类与多糖单独给药、合并给药均未显示出显著性降低;综上所述,肉苁蓉在发挥抗疲劳作用时,其有效成分苯乙醇苷类和多糖是通过不同途径及作用方式发挥药效。
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