土耳其斯坦东毕吸虫cDNA文库的构建及原肌球蛋白基因的克隆和表达

来源 :中国农业科学研究院 中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baobaolan1007
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
东毕吸虫病(orientobilharziasis)是由东毕属吸虫寄生于牛、羊等多种动物的门静脉和肠系膜静脉内引起的一种血吸虫病,其尾蚴也可感染人类引起尾蚴性皮炎(cercarial dermatitis),是一种重要的人兽共患寄生虫病。我国以土耳其斯坦东毕吸虫为主,该病在我国分布广泛,常呈地方和季节性流行,严重危害人们的健康并给畜牧业带来巨大经济损失。由于东毕吸虫感染人后特殊的发育过程,从而引起了人们广泛关注。目前东毕吸虫研究相对滞后于曼氏、日本血吸虫,因此深入研究东毕吸虫就显得尤为重要。 本文利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了土耳其斯坦东毕吸虫成虫cDNA文库。采用RT-PCR结合RACE和已构建的cDNA文库克隆了土耳其斯坦东毕吸虫原肌球蛋白(tropomyosin,TM)基因,提交GenBank,登录号为AY560898。TM部分编码序列亚克隆至原核表达载体pET28a(+),重组质粒pET28-TM在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达出可溶性融合蛋白,其分子量为37.5KDa左右,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白。Western-blotting结果表明纯化蛋白可以识别自然感染东毕吸虫的山羊血清;将纯化蛋白与法国Montanide ISA 206佐剂等体积混合免疫家兔,并收集血清到免疫后第10周。Western-blotting结果表明纯化蛋白可以被特异性免疫后血清识别,表明纯化蛋白可以刺激实验兔产生抗TM抗体。ELISA结果表明抗体在第5周时达到峰值,从第7周到第10周抗体一直保持较高水平。原肌球蛋白较好的免疫原性表明其在疫苗和诊断试剂研制方面有重要的应用前景。上述结果为进一步研究东毕吸虫病的免疫提供重要的基础。
其他文献
葛水平的中篇小说叙述着生活在城市边缘的乡村人们,不是表面对苦难的叙述,而是超越道德准则对人性的探索,用着“平静”娓娓道来,其中却有着厚重的力量,对于苦难的坚守和执着.
本项研究采用间接ELISA法、免疫酶组织化学法、生物素-亲合素(ABC)法、醋酸α-萘酯酶法,对高压静电场照射雏鸡的局部体液——泪液、气管液、肠液和胆汁的IgA、IgM、IgG含量,局
“各位观众,我们光荣的动物代表将乘‘中国梦’号想速超时光飞船,参加中国人民纪念抗日战争暨反法西斯战争胜利70周年阅兵式!这是我们动物界的无上荣光!”《动物世界》记者百灵鸟正在时光广场候机坪进行专题采访。  百灵鸟记者站在时光广场边上,只见兔山猴海,孩儿们欢乐地互相追逐,百灵鸟气喘吁吁地挤进去高喊:“战友们,静一静!孩儿们,停一停!谢谢大家,动物代表马上要进入候机坪啦!”嚯,刹那间,广场上井然有序,
禅之“空性”的安住阶段,就是对一切的肯定和接纳.“生命必须是绝对的肯定,必须超越阻碍它自由活动的一切条件、一切限制和一切对立.”这就是铃木大拙所说的"大肯定的禅
基于信息融合技术的智能照明控制,系统采用了红外对管传感器、红外传感器、照度传感器、声音传感器从多方位准确采集相关信息,将信息汇总,再由控制系统做出决策,点亮相应区域
要提高机械加工质量,必须提高加工零件所使用机床的几何精度,提高夹具、量具及工具本身精度,控制工艺系统受力、受热变形产生的误差,减少刀具磨损、内应力引起的变形误差,尽
遵义铁合金厂多年剥离采选过程中,在矿山积有不少的含锰20~25%的贫氧化锰矿。浮选车间每年向外排放大量的含锰11~16%的浮选尾矿,均未处理。不仅资源未能利用,并严重污染环境,堵
本文阐述了在民用建筑电气设计中电气设备选择的三个原则,并通过了解变压器的损耗,分析变压器的运行曲线,从而确定变压器在民用建筑电气设计中选择的方法.
川剧作为中国传统的戏曲的重要构成内容,在四川、重庆、贵州以及云南等部分地区较为流行.川剧表演艺术主要就是通过川剧脸谱、声腔、行当等相关结构共同组成,不同的结构内容
用开路调频广播替代城内有线广播□郑泽勋(云南省广南县广播电视局663300)城市的变化,通讯、电力的发展,给城内有线广播线路的架设、喇叭的安装和维护管理带来了越来越多的问题和矛盾:一