【摘 要】
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目的:通过用生物信息学技术预测布鲁氏菌Omp10蛋白的优势表位,对布鲁氏菌病急性期患者组和正常对照组中相关细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-10的检测,分析其在布鲁氏
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目的:通过用生物信息学技术预测布鲁氏菌Omp10蛋白的优势表位,对布鲁氏菌病急性期患者组和正常对照组中相关细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-10的检测,分析其在布鲁氏菌病发病过程中的意义,并通过Omp10蛋白刺激布鲁氏菌相关细胞因子的细胞探讨其免疫原性。 方法:1)利用IEDB在线软件和DNAStar软件,通过分析布鲁氏菌Omp10蛋白的分子结构、亲水性、柔韧性、表面可及性以及抗原指数等来确定其B细胞抗原表位及T细胞抗原表位;2)实验分为布鲁氏菌病急性期患者组和正常对照组,采用 ELISA方法检测血清中细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17、IL-10)的水平;3)通过ELISPOT法检测布鲁氏菌病急性期患者组及正常对照组外周血单个核细胞(PBMC)经布鲁氏菌抗原刺激产生IL-17和IL-10的斑点数。 结果:1)布鲁氏菌Omp10蛋白B细胞抗原表位有4个,为26-34、65-75、97-102和115-120氨基酸残基。Omp10蛋白T细胞抗原表位有6个,为64-79、72-87、104-119、6-21、9-24和78-93氨基酸残基;2)布鲁氏菌病急性期患者组IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17表达水平显著高于正常对照组,而IL-10水平与对照组相比显著降低;3)经Omp10蛋白刺激的布鲁氏菌病急性期患者组分泌IL-17的斑点形成细胞远远大于正常对照组;而IL-10的斑点形成细胞没有差异。 结论:1)通过生物信息学分析Omp10蛋白具有高亲水性,柔韧性较好,表面可及性大,高抗原指数的特点,有多个T细胞和B细胞优势表位,Omp10蛋白刺激分泌细胞因子IL-17的斑点形成细胞增多,表明Omp10蛋白具有免疫原性,可以作为候选疫苗;2)布鲁氏菌病急性期患者的炎性细胞因子水平IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α升高,可能与疾病的发展有关。
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