1型鸭肝炎强毒和弱毒疫苗诱导鸭先天免疫应答的比较

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对1型鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis A Virus Type 1,DHAV-1)强毒感染和弱毒疫苗免疫雏鸭及成年鸭后诱导先天免疫的差异开展系列研究,试验结果如下:1、DHAV-1强毒感染和弱毒疫苗免疫鸭临床表现及显微病理变化7日龄雏鸭和160日龄成年鸭分别感染强毒DHAV-1 CH株和免疫弱毒疫苗DHAV-1 CH60株,雏鸭在感染DHAV-1强毒CH株后24–36 h大量死亡,尸体剖检可见肝脏肿大、出血等病变。雏鸭和成年鸭免疫DHAV-1 CH60株及成年鸭感染DHAV-1强毒CH株均无任何临床症状及剖检病变。雏鸭在感染DHAV-1强毒CH株,组织学检查可见肝脏有明显的出血,肝细胞坏死、减少,呈空泡变性;肾脏肾小管上皮细胞肿胀、出血;脾脏可见淋巴细胞减少,炎性细胞浸润。成年鸭在感染DHAV-1 CH株后,肝脏、脾脏有轻微的病变。成年鸭和雏鸭在免疫接种DHAV-1 CH60株后,肝脏、脾脏和肾脏均未见组织病理损伤。2、DHAV-1强毒致成年鸭和雏鸭肝细胞凋亡及超微结构变化成年鸭和雏鸭感染DHAV-1 CH株均可诱导肝脏细胞凋亡。雏鸭和成年鸭感染DHAV-1 CH株36 h后,电镜观察均可见自噬和凋亡相关的超微结构的病变。3、DHAV-1强毒和弱毒疫苗感染/免疫成年鸭和雏鸭组织器官病毒载量比较为了更好地比较强毒和弱毒疫苗感染/免疫雏鸭和成年鸭各器官病毒载量的差异,本研究检测了雏鸭和成年鸭感染DHAV-1后在血液、肝脏、肾脏和脾脏中的病毒增殖情况。在雏鸭血液、肝脏、肾脏和脾脏中,DHAV-1强毒CH株感染组的病毒拷贝数明显高于DHAV-1弱毒CH60株免疫组的病毒拷贝数,而在成年鸭血液、肝脏、肾脏和脾脏中,DHAV-1强毒CH株感染组的病毒拷贝数和DHAV-1弱毒CH60株免疫组的病毒拷贝数相比相差不大。雏鸭和成年鸭感染DHAV-1 CH株和免疫DHAV-1CH60株后,雏鸭肝脏、脾脏、肾脏和血液中病毒拷贝数均比成年鸭肝脏、脾脏、肾脏和血液中病毒拷贝数高得多。4、DHAV-1强毒感染和弱毒疫苗免疫鸭肝脏细胞因子的表达模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRR)通过识别侵入的病原微生物,介导先天免疫应答。雏鸭和成年鸭分别感染DHAV-1强毒CH株和免疫DHAV-1 CH60株后TLR-3、TLR-7、RIG-I和MDA5表达水平均会有明显的上调,其中以TLR-7的转录水平上调尤为显著。雏鸭和成年鸭在免疫DHAV-1 CH60株后MHC-I、MHC-II均有上调,成年鸭上调更为明显。总的来说DHAV-1 CH60株免疫鸭MHC-I、MHC-II的表达明显高于DHAV-1强毒CH株。雏鸭感染DHAV-1强毒CH株和免疫CH60弱毒株后可诱导干扰素、白介素和抗病毒蛋白的大量转录。感染DHAV-1强毒CH株后雏鸭肝脏细胞因子表达水平明显高于DHAV-1 CH60株免疫的雏鸭,而成年鸭感染DHAV-1强毒CH株和免疫DHAV-1CH60弱毒株后细胞因子总体表达水平无明显差异。
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