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背景近年研究发现,经典的辅助性T细胞1(T helper cell 1, Th1)/辅助性T细胞2(T helper cell 2, Th2)失衡学说并非哮喘发病机制的全部,新兴的辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)／调节性T细胞(T regulatory cell, Treg)失衡学说可能是该机制的重要补充。结合后者与哮喘发病的关系,探究某些常用药物对此平衡的影响可能为治疗哮喘提供新的思路。孟鲁司特作为抗过敏平喘药长期应用于哮喘的临床治疗,具有一定的抗炎及抑制气道重塑的效应,但其具体机制仍有待探讨。目的观察支气管哮喘大鼠Th17/Treg平衡的变化,探讨孟鲁司特对Th17/Treg平衡的干预效应及意义,为其应用于临床提供实验依据。方法40只6-8周龄健康雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠随机分为空白对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、孟鲁司特组(M组)及地塞米松组(D组),每组10只。A组、D组及M组于第1天腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA)和Al(OH)3混合液致敏,第8天重复致敏1次,自第15天开始给予OVA生理盐水溶液雾化激发,每日1次,每次30 min,持续8周,建立哮喘大鼠模型；M组及D组在每次激发前分别给予孟鲁司特钠灌胃、地塞米松腹腔注射；C组腹腔注射及雾化吸入均使用Al(OH)3生理盐水混悬液替代。8周后收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)进行细胞分类计数；流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检测血液中Th17细胞及Treg细胞占CD4+细胞百分率；酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血浆中白细胞介素(interleukin, IL)-17及IL-10浓度；苏木精-伊红(hematoxylin and eosin, HE)染色评价肺组织病理学改变并计算气道形态学参数。结果(1)一般情况变化：A组大鼠在激发过程中或之后出现呼吸急促甚至喉间喘鸣、烦躁不安、二便失禁等症状,反复激发后出现毛发脱落、反应迟缓、体重减轻或增长缓慢,提示造模成功。D组及M组上述症状均较A组减轻,两组间差异不明显。C组无症状或较轻微。(2)肺组织病理学改变：A组支气管、血管周围可见大量炎性细胞(如淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等)浸润,伴支气管痉挛、上皮细胞脱落、气道壁增厚、胶原沉积增加、粘液产生增多,D组和M组上述改变均较A组减轻,两组间差异不明显。C组无明显上述改变。(3) BALF细胞计数及分类计数：A组、D组及M组的BALF细胞总数、中性粒细胞总数及比例、嗜酸性粒细胞比例、淋巴细胞比例均较C组明显偏高(P<0.01)；D组及M组BALF细胞总数、PMN总数及比例、EOS比例、Ly比例均低于A组(P<0.01)；M组与D组间BALF细胞总数、PMN总数及比例、EOS比例及Ly比例差异无统计学意义(P>0.05)。(4) Th17、Treg占CD4+淋巴细胞比例及相关细胞因子表达水平：C组、D组及M组的Th17细胞占CD4+淋巴细胞比例及IL-17表达水平均较A组明显偏低(P<0.01)；A组、D组及M组的Treg细胞占CD4+淋巴细胞比率及IL-10表达水平均较C组明显偏低(P<0.01)；D组与M组间Th17、Treg占CD4+淋巴细胞比率及IL-17、IL-10表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。(5)气道形态学参数：C组、D组及M组的气管壁厚度(Wat/Pbm)及平滑肌厚度(Wam/Pbm)均较A组明显偏低(P<0.01)；D组与M组的Wat/Pbm及Wam/Pbm差异无统计学意义(P>0.05)。(6)相关性分析：PMN比率与Th17比率及IL-17表达水平呈显著正相关(r=0.89、0.93,P<0.01),与Treg比率及IL-10表达水平呈显著负相关(r=-0.84、-0.82,P<0.01)；EOS比率与Thl7比率及IL-17表达水平呈显著正相关(r=0.87、0.92,P<0.01),与Treg比率及IL-10表达水平呈显著负相关(r=-0.91、-0.82,P<0.01)；Wam/Pbm与Th17比率及IL-17表达水平呈显著正相关(r=0.77、0.79,P<0.01),与Treg比率及IL-10表达水平呈显著负相关(r=-0.76、-0.74,p<0.01)。结论(1)哮喘大鼠存在Th17占优势的Th17/Treg失衡,且该失衡可能参与了气道炎症及气道重塑等病理过程；(2)孟鲁司特对Th17/Treg失衡存在良性调节,并可能借此进一步减轻气道炎症、抑制气道重塑。