通过RNAi技术增强番茄对根结线虫的抗性

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a18102023
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植物寄生线虫是一类寄主广泛,严重威胁农作物生产的病原,每年给世界农业生产造成的损失大约1250亿美元(Chitwood,2003),其危害主要来自根结线虫(Meloidogyne spp.)和孢囊线虫(Heterodera and Globodera spp.)为主的固着型内寄生线虫,特别是根结线虫,其寄主范围广泛,适应性强,传播途径多样。目前生产上主要以化学药剂杀线虫为主,但是化学杀线剂残留时间长、毒性大,严重污染环境。因此通过分子生物学手段选育抗性作物品种是最经济、有效,也是最安全途径。本研究的目的:本研究选取了根结线虫寄生相关的三个基因作为靶基因构建RNAi载体,通过番茄遗传转化,培育稳定株系,并进行转基因植株表型评价,借助RNAi技术,增强转基因番茄对根结线虫的抗性。获得的主要结果如下:1.根据NCBI中已公布的根结线虫Mi-crt (AF402771)、Mi-vap (EF370396)、16D10 (DQ087264)基因序列信息,克隆了3个目标基因的片段,并分别构建了RNAi表达载体。2.利用农杆菌介导的遗传转化方法,将目标基因片段导入番茄品种AC中。PCR检测结果表明,外源基因已整合到番茄基因组中。3.部分转基因植株的RT-PCR分析结果表明,在转基因植株中的根部组织内,寄生根结线虫的3个寄生基因的表达受到明显的抑制。4.转基因植株的根结线虫抗性评价结果显示,To转基因植株有23株获得了根结线虫抗性,并且抗性遗传给了T1代。
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