论文部分内容阅读
目的:胰腺癌的特点是早期出现侵袭转移和高死亡率。本课题研究了miR-143在胰腺癌细胞侵袭和转移中的作用及其初步机制。 方法:本课题选取胰腺癌Panc-1细胞进行试验。miR-143的表达通过腺病毒载体的miR-143表达框建立(Ad-miR-143)。基因的mRNA和蛋白表达水平分别通过RT-PCR和Western blot检测。Rho GTP酶的活性测定则通过pull down分析。miR-143在胰腺癌Panc-1细胞迁移和侵袭中的作用在体外检测。miR-143的抗胰腺癌转移作用在Panc-1细胞的原位肝脏转移模型中试验。miR-143的抗肿瘤生长作用在Panc-1细胞的皮下移植瘤模型中试验。 结果:实验证实了ARHGEF1(GEF1)，ARHGEF2(GEF2)和K-RAS基因是miR-143的作用靶点。 miR-143的表达显著降低了GEF1，GEF2，和K-RAS基因的mRNA和蛋白表达水平;显著降低了其组成的RhoA，Rac1和Cdc42 GTP酶的活性;显著降低了MMP-2，MMP-9的蛋白水平;但显著增加了E-cadherin的蛋白表达水平。体外实验，miR-143的表达显著抑制了Panc-1细胞的迁移和侵袭;体内动物实验，miR-143的表达显著抑制了肝转移灶，和皮下移植肿瘤的生长。 结论: miR-143在胰腺癌的侵袭和转移中发挥了重要的作用，miR-143的失（低）表达可能是导致胰腺癌高度侵袭性和转移性的重要原因，miR-143是胰腺癌的一个极具潜力的治疗靶点。