目的：晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products，AOPP)是witko-Sarsat等人于1996年首次报道的由尿毒症血液透析患者血浆中分离出的蛋白交联产物，作为氧化应激(oxidative stress，OS)新的标志物，是有一定生物学活性的促炎症反应介质。AOPP作为尿毒症毒素分子参与慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)和透析患者临床一些并发症发生的病理生理过程。本研究旨在通过人工合成晚期氧化蛋白产物．人血清白蛋白(AOPP．HSA)模型诱导体外培养的人腹膜间皮细胞(humanperitoneal mesothelial cells，HPMCs)对TGF-β<,1>表达的影响及内源性活性氧(reagtive oxygen species，ROS)在此过程中的调节机制，来探讨AOPP与维持性腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis，CAPD)相关腹膜纤维化之间的关系，从而为临床防治腹膜纤维化提供理论依据。 方法：采用Witko-Sarsat等介绍的方法，分别按照摩尔比为1/12.5、1/25、1/50、1/100将无内毒素的人血清白蛋白(human serum albumin，HSA)与次氯酸溶液反应，体外制备出四种不同氧化修饰程度的AOPP-HSA模型。从CAPD治疗的CKD患者腹膜透析流出液中分离并在含10﹪胎牛血清的RPMI 1640培养基中原代培养人腹膜间皮细胞，第二代细胞应用免疫组化方法进行细胞鉴定，第三代细胞用于实验，分别按照不同的实验要求分成浓度依赖组、时间依赖组、药物干预组。采用ELISA法检测HPMCs上清液中TGF-β<,1>蛋白水平，采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)半定量分析HPMCs中TGF-β<,1>mRNA的基因表达水平，同时应用流式细胞仪检测细胞内对氧化剂敏感的2，7-二氢二氯荧光素(DCFH)发生氧化所产生的荧光量，从而间接的反映细胞内活性氧的生成水平。分别用不同浓度的抗氧化剂维生素E(12.5μmol/L、25.1μmol/L、50μmol/L)，和N-乙酰半胱胺酸(0.1 mmol/L、1.0mmol/L、10mmol/L)预处理细胞，观察抗氧化剂对HPMCs内源性ROS及TGF-β<,1>表达的影响。结果： 1．AOPP-HSA能显著诱导人腹膜间皮细胞TGF-β<,1>的分泌与基因表达，呈剂量依赖方式(P<0.01)，在0-48h内TGF-β<,1>的分泌与基因表达随时间的延长而增多，呈正相关关系(P<0.05)，在48h达到高峰(P<0.01)，随后出现降低。并且也与HSA/HOCL摩尔比成正相关关系(P<0.01)。 2．AOPP-HSA也明显增加腹膜间皮细胞ROS的生成量，呈剂量依赖方式(P<0.01)，在0、15、30min时间内平均荧光强度变化与时间呈依赖方式，在30min达到高峰(t=-26.073，P<0.01)，随后在60min、120min内逐渐下降(t=-20.607、-11.813，P均<0.05)。并且也与HSA/HOCL摩尔比成正相关关系(P<0.01)。 3．分别用不同浓度的抗氧化剂维生素E(12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)和N-乙酰半胱胺酸(0.1 mmol/L、1.0mmol/L、10mmol/L)预处理细胞，与PBS对照组相比，可明显地降低细胞内ROS的生成量，同时显著地抑制AOPP-HSA诱导人腹膜间皮细胞TGF-β<,1>的分泌与基因表达，呈剂量依赖方式(P<0.01)，其中维生素E(50μmol/L)组和NAC(10mmol/L)组抑制更加显著。 4．未经HOCL修饰的HSA不能显著的诱导人腹膜间皮细胞TGF-β<,1>的分泌与基因表达及增加细胞ROS的生成量，与PBS对照组比较，无显著的统计学差异(P>0.05)。 结论： 1．体外制备的AOPP-HSA可显著诱导人腹膜间皮细胞TGF-β<,1>的分泌与基因表达，部分可能通过内源性ROS介导细胞内信号转导途径调节此过程，提示AOPP可能通过增加体内氧化应激参与腹膜纤维化的形成过程。 2．体外制备的AOPP-HSA可刺激人腹膜间皮细胞呼吸爆发，而抗氧化剂维生素E和N-乙酰半胱胺酸可显著降低细胞ROS的生成量。 3．维生素E和N-乙酰半胱胺酸作为抗氧化剂通过清除细胞ROS而显著抑制TGF-β<,1>的分泌与基因表达。 4．此研究揭示抗氧化剂在防治腹膜纤维化发生、发展过程中可能是一种有效的药物，为抗氧化剂在临床上的应用提供可靠的理论依据。