乳腺恶性肿瘤是当代妇女最常见的影响健康的疾病,其发病人数在我国逐年增加。目前,乳腺恶性肿瘤的治疗主要是手术、放射疗法、化学疗法和内分泌疗法。但是,这些方法对乳腺恶性肿瘤的复发,转移及晚期乳腺恶性肿瘤,仍然不能取得理想效果。因为乳腺恶性肿瘤是一种异质性疾病,所以现在还没有适用于所有乳腺恶性肿瘤治疗的金标准。所以,创建针对性的乳腺癌的免疫疗法,使之成为重要的治疗方法,是当前的探讨讨论的重点。现在,肿瘤免疫疗法已经是手术,放疗、化学疗法之后的又一种治疗肿瘤的模式,而且具有针对性强及创伤小等特点,特别是对一些手术效果不好的乳腺癌不失为一种很好选择。这其中,鉴别出合适的靶抗原,是抗原特异性肿免疫疗法的最重要的一步,也是也是最关键的一步。肿瘤抗原可以做成肿物免疫疗法的标靶,但是必须满足一定条件,即其于肿物组织中高表现,并且在正常人体中低表达,或者它的表现拥有极高限定性,以避开它在治疗的时候可能出现的自身免疫性病变。癌/睾丸抗原(cancer/testis antigen, CTA)是肿物相关抗原其中的一种,它在睾丸及胎盘中表达,但除此之外的人体常见组织中都不表达,而在不一样的组织类型的肿瘤内均有很高的表达,因为此种特殊性的表达模式,可以选做癌症免疫疗法理想的目标抗原。身为CTA其中一个亚类组成,黑色素相关抗原基因(Melano ma-associated antigen gene, M A G E)被从黑色肿物细胞中分离出,为一个大家庭抗基因。MAGE基因可以编码肿瘤,其排斥抗原,在细胞内加工生产出抗原肽,它和HLA-Ⅰ类分子可以结合形成复合物,可以被自身细胞毒性细胞辩别,进而诱导对对应肿物细胞造成针对性的杀伤。所以,对MAGE基因的深入研究,将来可以为肿瘤分子生物学的诊断和肿瘤基因的免疫治疗提供良好的基础。MAGE抗原按照表达的方式不同,可以将MAGE家族分成两个不相同类型,为MAGE-Ⅰ类和MAGE-Ⅱ类。这之中MAGE-Ⅰ类抗原是肿瘤特异性抗原,MAGE-Ⅱ类抗原在普通的成人体细胞中是普遍表达的,所以不属于CTA的范围。MAGE-Ⅰ类抗原可以分为三个亚类,为MAGE-A,MAGE-B以及MAGE-C。这之中,MAGE-A包含 12 个种类,为 MAGE-A 1 至 MAGE-A 12。现在对 MAGE-A 10 和 MAGE-12在乳腺恶性肿瘤中的表现和在乳腺恶性肿瘤发生发展中的作用的研究还不多。本次实验采用免疫组化法,从蛋白质水平上探讨了 MAGE-A 10和MAGE-A 12于乳腺恶性肿瘤组织中和其相对应的乳腺良性肿物组织中的表达状况,以及其与乳腺恶性肿瘤临床指标和后续效果两者之间的关联。目的检验测试MAGE-A10和MAGE-A12在睾丸正常组织、乳腺良性病变以及乳腺恶性病变组织中的表达,然后讨论它的表达与乳腺恶性肿瘤临床指标以及预后之间的关联。方法使用免疫组化学的实验方式分别检验了 MAGE-A10和MAGE-A12的蛋白质在70例睾丸正常组织、70例乳腺良性组织和70例乳腺恶性组织中的表达状况,然后讨论它们是否表达与乳腺恶性肿瘤临床指标相互是否存在关联,包括病人年龄、肿瘤大小、病理类型、组织学分级、临床分期、淋巴转移、雌激素受体(Estrogenreceptor,ER),孕激素受体(Progestrogen receptor, PR)及 HER-2。通过病人随诊,研究MAGE-A10和MAGE-A 12蛋白质表达和乳腺恶性肿瘤病人预后之间的关系。结果1MAGE-A10和MAGE-A12在正常睾丸组织中的表达选择常见的睾丸标本设为MAGE-A 10及MAGE-A 12表现阳性结果对比。在正常睾丸组织中,MAGE-A 10和MAGE-A 12都主要在初级精母细胞(primary spermatocyte,PSC)和精原细胞(spermatid, ST)中表现,其阳性结果物质多数在胞质内,其余的位于胞核。2 MAGE-A 10和MAGE-A 12在乳腺良性组织及乳腺恶性组织中的表达免疫组织化学染色的结论表明,MAGE-A 10在乳腺恶性组织中的免疫组织化学染色阳性结果物质大多数位于胞质,小部分位于胞核。70例乳腺良性病变中未发现MAGE-A 10蛋白质的表达,70例乳腺恶性病变组织有53例MAGE-A 10蛋白质表达阳性,阳性结果的百分率为75.7%,显著高于乳腺正常病变中的表现(P<0.05)。以上结果显示,肿瘤抗原MAGE-A10具有特异性。免疫组化学染色的结果表明,MAGE-A12在乳腺恶性组织中的免疫组化学染色阳性结果物质大多数位于胞质,小部分位于胞核。70例乳腺正常病变中未发现MAGE-A12蛋白质的表达,70例乳腺恶性病变组织有39例MAGE-A 12蛋白质表达阳性,阳性结果的百分率为55.7%,显著高于乳腺正常病变中的表现(P<0.05)。以上结果显示,肿瘤抗原MAGE-A12具有特异性。3 MAGE-A10和MAGE-A12蛋白质表达和乳腺恶性肿瘤临床病理学指标之间的关系统计研究结果表明,MAGE-A10蛋白质表达和乳腺恶性肿瘤病人年龄(χ2=1.006,P=0.632)、病理类型(χ 2=2.287,P=0.151)、组织学分级(χ 2=0.595,P=0. 684 ),临床分期(χ 2=1.404,P=0.496 )、肿瘤组织大小(χ 2=0.617,P=0.702)、淋巴结转移(χ2=0.042, P=0.720),ER( χ 2=1.747,P=0.194)及 PR表达(χ 2=0.507, P=0.506)都不相关。MAGE-A12蛋白质表达与乳腺恶性肿瘤病人的年龄(χ 2=0.502, P=0.753 )、病理类型(χ 2=0.029, P=0.785 )、组织学分级(χ 2=0.699,P=0.701)、临床分期(χ2=0.586,P=0.605)、肿瘤组织大小(χ 2=2.400,P=0.289)、淋巴结转移(χ 2=2.296,P=0.203),PR表达(χ 2=0.173, P=0.706)都不相关(P>0.05),但是与ER的表达表现出正相关性。37个ER表达的乳腺恶性肿瘤病人中有26例MAGE-A12蛋白质的表达呈阳性(69.7% ),38个ER表达阴性的乳腺恶性肿瘤病人中有15例MAGE-A 12蛋白质表现阳性(36.2%),此两者之间具有统计学意义(χ2=8.381,P=0.006)。4 MAGE-A 10和MAGE-A 12蛋白质表达与HER-2表达之间的关系免疫组化染色的结果表明,HER-2在乳腺恶性肿瘤中的免疫组化学染色阳性物质多数定位在细胞膜。统计分析结果表明,70例乳腺恶性肿瘤病人中有8例HER-2 表达为(-)(11.4%),28 例 HER-2 表达为(+)(40%),19 例 HER-2 表达为(++)(27.1 %),15 例 HER-2 表达(+++) (21 %)o统计分析结果表明,MAGE-A 10的表达与HER-2表达无相关性(χ 2=1.583,P=0.643 )。HER-2表现阳性的乳腺恶性肿瘤病人中MAGE-A12蛋白质的表达显著高于HER-2表现阴性的乳腺恶性肿瘤病人(χ 2=14.032, P=0.004)。5 MAGE-A10和MAGE-A12蛋白质表达和乳腺恶性肿瘤病人的生存率之间的关系统计研究结果表明,MACE-A 10表现出阳性的乳腺恶性肿瘤病人的生存率与MAGE-A 10表现出阴性的乳腺恶性肿瘤病人相比,两者之间并无显著差别(P=0.821)。MAGE-A 12表现出阳性的乳腺恶性肿瘤病人的生存率与MAGE-A12表现出阴性的乳腺恶性肿瘤病人比较,显著降低(P=0.030)。提示,MAGE-A12蛋白质表达,有可能是乳腺恶性肿瘤病人预后不好一个重要标识。结论1乳腺正常病变中不表达MAGE-A 10和MAGE-A12的蛋白质。MAGE-A 10和MAGE-A 12在乳腺恶性肿瘤组织中的表达率分别为75.7%和55.7%。表明肿瘤抗原MAGE-A 10和MAGE-A12具有特异性。2MAGE-A10蛋白质表达与乳腺恶性肿瘤病人的年龄、病理类别、组织学分级、临床分期、肿物大小、淋巴转移、ER和PR表现状况均无相关性。3 MAGE-A 12蛋白质表达和乳腺恶性肿瘤病人的年龄、病理类型、组织学分级、临床分期、肿物大小、淋巴转移、孕激素受体表达都没有相关性,但是与ER的表达呈正相关性。ER表现出阳性的乳腺恶性肿瘤病人中MAGE-A12蛋白质的表达显著高出ER表现出阴性的乳腺恶性肿瘤。4 MAGE-A 10的蛋白质和HER-2的表现没有关系。MAGE-A12蛋白质表达与HER-2表现为正相关。HER-2表现出阳性的乳腺恶性肿瘤中MAGE-A12蛋白质的表达显著高出HER-2表现阴性的乳腺恶性肿瘤病人。这表明,MAGE-A12蛋白质表现可能与乳腺恶性肿瘤预后不好相关。5 MAGE-A10蛋白质表达呈阳性的乳腺恶性肿瘤病人的生存率与MAGE-A 10表达呈阴性的乳腺恶性肿瘤病人相比较,没有显著差别。MAGE-A 12蛋白质表现阳性的乳腺恶性肿瘤病人的生存率与MAGE-A 12表达阴性的乳腺癌恶性肿瘤病人比较,显著降低。这表明,MAGE-A 12蛋白质表现可能是乳腺恶性肿瘤病人预后不好一个重要标识。