苦苣菜总黄酮提取、纯化工艺优化及抗氧化活性研究

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苦苣菜含有天然黄酮类化合物,具有降低高血压、调节免疫力、抗衰老、抗氧化等作用。将苦苣菜作为原料,将黄酮提取量作为考察指标,分别研究了超高压法、超声波法、乙醇回流法提取苦苣菜总黄酮的工艺条件1;使用大孔树脂初步纯化了苦苣菜总黄酮;分别使用DPPH自由基体系、超氧阴离子体系、羟基自由基体系、ABTS自由基体系评价了苦苣菜总黄酮的抗氧化活性及清除自由基的能力;其结论如下:(1)分别使用超高压法、超声波法、乙醇园流法从苦苣菜中提取黄酮类物质,并使用响应曲面法分别优化其提取工艺,确定最佳提取方法,实验结果表明:超高压提取法不但提取时间最短,而且黄酮提取量最高,可达5.753mg/g,其最佳提取工艺为:乙醇体积分数50%、保压时间8.32min、提取压力为446MPa、料液比为1:70(g/mL)。(2)使用大孔树脂纯化苦苣菜黄酮,在筛选八种大孔树脂以确定最适纯化苦苣菜黄酮树脂的基础上,使用响应曲面法分别优化吸附过程与解吸附过程,并确定最佳纯化工艺,实验结果表明:AB-8型大孔树脂最适宜纯化苦苣菜黄酮类物质;其吸附最佳工艺条件为:上样液浓度3.73mg/mL,上样液速率2.31mL/min,上样液pH为4.18,吸附率可达84.32%;解吸附最佳工艺条件为:乙醇洗脱浓度79.96%,解吸流速1.25mL/min,乙醇洗脱体积6.38BV(柱体积),洗脱率可达为91.73%。纯度由34.78%提高至82.91%,纯度提高了2.39倍。(3)使用DPPH自由基评价法、超氧阴离子评价法、羟基自由基评价法、ABTS自由基评价法4种方法来评价苦苣菜各部位(根、茎、叶)黄酮的抗氧化活性。实验结果表明:苦苣菜各部位(根、茎、叶)黄酮均具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力与Vc、BHT等阳性对照物相比较,在清除羟基自由基能力方面,比阳性对照品更强,在清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基能力方面与阳性对照品相当。证明苦苣菜黄酮提纯物是良好的天然抗氧化剂。
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