极端嗜盐古菌蛋白需在高盐条件下才能正确行使功能，而在常用的原核表达宿主（如Escherichia coli）中表达时会错误折叠而聚集形成包涵体，因此有必要建立一个合适的以极端嗜盐古菌为宿主的蛋白表达纯化体系。本研究利用PHA颗粒易于分离、以及颗粒结合蛋白PhaP表达量高的特点，建立了一套以地中海富盐菌phaP缺陷株(ΔphaP)为宿主，基于PHA颗粒和PhaP标签的极端嗜盐古菌蛋白的表达纯化系统，并探讨了嗜盐古菌内含肽在该系统优化中的应用。　　本研究分为两个部分：第一部分以嗜盐古菌-大肠杆菌穿梭载体pWL502作为载体基本骨架，并选取PhaP作为蛋白表达标签，同时插入phaP基因自身强启动子P5219a、多克隆位点、终止子等元件构建表达载体pPM。进一步地，我们引入嗜盐古菌蛋白GvpE作为报告蛋白，优化了PHA颗粒-PhaP标签介导的蛋白表达纯化方法。SDS-PAGE结果表明，利用ΔphaP-pPM系统，gvpE在强启动子P5219a的控制下实现了高效表达，通过蔗糖密度梯度离心的方式就可以纯化得到PhaP融合蛋白；第二部分在phaP基因与多克隆位点之间引入特定的嗜盐古菌内含肽编码序列hbt21，构建了另一个表达载体pIP。结果表明，Hbt21在地中海富盐菌中保持了高效的剪接活性，通过定点突变其活性剪接位点(N182A)，成功使其稳定连接于PhaP标签。在此基础上，我们引入了嗜盐古菌特异的β-酮硫解酶β亚基BktBβ作为报告蛋白，并由此构建了重组质粒pBIP及其衍生质粒。其中，pBIP质粒的表达纯化产物经质谱鉴定为Hbt21-PhaP（IP）和BktBβ-Hbt21-PhaP（BIP）的混合物，说明ΔphaP-pN182A系统可以初步实现目标蛋白-内含肽-PhaP融合蛋白的表达与纯化，但要实现内含肽-PhaP标签的N-端可控断裂以获得目标蛋白，该载体系统还需进一步优化。总结说来，本文首次建立了一套基于PHA颗粒-PhaP标签的简便实用的极端嗜盐古菌蛋白表达纯化系统;通过引入嗜盐古菌型内含肽并突变其C端剪接的活性位点，内含肽稳定连接于PhaP标签，为该内含肽将来应用于PhaP融合蛋白的标签去除奠定了基础。