猫传染性腹膜炎病毒（Feline Infectious Peritonitis Virus,FIPV）是猫冠状病毒（Feline Coronavirus,FCo V）的一种,可以引发猫科动物异常免疫反应导致的高致死率疾病——猫传染性腹膜炎（Feline Infectious Peritonitis,FIP）,属于冠状病毒科α冠状病毒属。FIP是猫最重要的致命感染性疾病之一,其发病机制尚未完全揭示。虽然没有直接证据表明FIPV具有高传染性,但是常见的FCo V有突变为FIPV的可能,且FCo V是猫群中的感染率最高的病毒,有较高的传染性。虽然临床上已开发多种药物用于治疗FIP,但是效果都不明显。同时,常规技术研制的FIPV疫苗都不能对宿主产生有效的保护效果,还会引发FIPV感染的抗体依赖性增强效应（Antibody-dependent enhancement,ADE）。因此,设计并生产一种安全、高效的FIPV疫苗对防治该疾病十分重要。FIPV依靠形成病毒囊膜的刺突（S）蛋白进行受体识别,完成对宿主细胞的吸附和入侵,所以本研究针对FIPV S蛋白与细胞膜的受体结合区域（Receptor binding domain,RBD）设计疫苗。为了提高疫苗的稳定性和免疫原性,选择了铁蛋白（ferritin）纳米颗粒作为抗原递呈系统。铁蛋白表达后可以自组装成纳米笼结构,给RBD的展示提供一个良好的平台,使f RBD-Ferritin纳米颗粒疫苗更好的激活宿主产生能够阻断S蛋白与宿主受体结合的中和性抗体,进而抵御FIPV的感染。首先,我们构建了同时包含FIPV RBD结构域和Ferritin基因的重组质粒,转化为穿梭质粒后转染SF9昆虫细胞,成功拯救出可以表达f RBD-Ferritin自组装蛋白纳米颗粒的重组杆状病毒。随后,通过PCR、WB及IFA鉴定,确定重组杆状病毒感染SF9昆虫细胞后可以分泌表达f RBD-Ferritin蛋白,在感染后84h蛋白表达量最高,且病毒可以稳定传代。同时,电镜观察结果显示,f RBD和Ferritin蛋白融合表达后,Ferritin形成的纳米笼结构对f RBD蛋白形成了很好的展示作用。为了评估f RBD-Ferritin自组装蛋白纳米颗粒疫苗是否能诱导机体产生针对FIPV的特异性抗体,对小鼠进行了疫苗免疫实验。结果表明,疫苗免疫后,小鼠体内可以产生针对FIPV RBD的特异性抗体,且抗体水平持续期较长。最后,我们制备了基于FIPV S基因的假病毒,验证了疫苗免疫后产生的特异性抗体对FIPV假病毒具有中和能力。综上所述,本研究拯救出的重组杆状病毒可以高效表达f RBD-Ferritin自组装蛋白纳米颗粒,在免疫后可以产生对病毒具有中和能力的特异性抗体,为FIPV的防控提供了一种新的候选疫苗。