葡萄糖苷酶产生菌的筛选及应用

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本文通过多种筛选方案,从土壤中分离得到十株对几种糖苷化合物水解活性都较高的产β-葡萄糖苷酶菌株,并从中选出一株可以水解人参皂苷Rg3生成高抗癌活性皂苷Rh2的菌株,经鉴定为镰孢菌属,命名为Fusariumsp.ECU2042。通过培养进程的考察确定了最优发酵时间及培养基,并发现人参总皂苷对产酶有明显诱导作用。对该酶催化的人参皂苷Rg3水解反应进行了条件优化,以该酶为催化剂制备获得了人参皂苷Rh2纯品。最后,对该β-葡萄糖苷酶进行了部分纯化,酶的纯化倍数达到49.4倍,酶活回收率为13%。该β-葡萄糖苷酶能水解纤维二糖,但对人工底物对硝基苯基-β-D-葡萄糖苷(PNPG)没有活性,其最适pH和最适温度分别为pH5.0~6.0和50℃。
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