梁子湖中华沙塘鳢核型、DNA含量及外周血细胞显微结构研究

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中华沙塘鳢,隶属鲈形目,鰕虎鱼亚目,沙塘鳢科,沙塘鳢属,是一种小型底栖肉食性鱼类。中华沙塘鳢不仅含肉率高,而且肉嫩味美,是江浙一带备受欢迎的传统名贵食用鱼。2010年“世博第一菜”的美誉更加使得人们对中华沙塘鳢及沙塘鳢属其他鱼类的需求量与日俱增。然而,近年来由于我国自然水域的环境日益恶化,加上无节制的捕捞,野生的中华沙塘鳢资源量锐减,其捕捞产量远远不能满足人们的需求,规模化人工养殖潜力巨大。为了掌握中华沙塘鳢的细胞遗传学及血液学特征,同时也为沙塘鳢属鱼类的良种选育以及规模化养殖等方面的研究提供一些参考资料,本研究采用头肾-PHA体内注射法、流式细胞仪法及瑞氏-吉姆萨染色法研究了梁子湖中华沙塘鳢的核型、DNA含量和外周血细胞的显微结构。研究结果如下:1.中华沙塘鳢的核型分析本研究以梁子湖中华沙塘鳢为实验材料,采取PHA-活体注射法制备其染色体标本,对中华沙塘鳢的染色体数目、核型公式、臂数等特征进行了研究。挑选并计数了128个清晰可见且分散较开的中期分裂相。结果表明:梁子湖中华沙塘鳢为二倍体鱼类。染色体数目2n=44的体细胞占总数的61.72%,因此,可以确定梁子湖中华沙塘鳢的染色体数目2n=44。未见异型性染色体、随体或次缢痕等。根据分析测量结果,梁子湖中华沙塘鳢的44条染色体最终可以配成22对,其中最大的为第1对,相对长度5.91%;最小的为第22对,相对长度3.33%,而且均为端部着丝粒染色体(T),核型2n=44T,NF=44。2.中华沙塘鳢核DNA含量研究本研究采用外标法,并以公鸡血细胞核DNA绝对含量(2.50 pg/2C)为参考标准,用流式细胞仪检测了梁子湖中华沙塘鳢的血细胞核DNA含量。统计结果显示,梁子湖中华沙塘鳢血细胞核DNA绝对含量为(2.38±0.03)pg/2C;基因组大小为1.17×109bp。3.中华沙塘鳢外周血细胞显微结构采用血球计数板、常规血涂片及瑞氏-吉姆萨染色法对梁子湖中华沙塘鳢外周血细胞的数量、形态和大小进行了观测。最终可鉴别出5种类型的血细胞,即红细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞、血栓细胞;此外,本研究还观察到了少量的幼稚红细胞、分裂红细胞以及分解红细胞。中华沙塘鳢外周血细胞中红细胞占大多数,其密度为(1.47±0.12)×1012个/L;血红蛋白含量为(51.61±7.96)g/L。中华沙塘鳢的白细胞中,血栓细胞数量占绝对优势,为58.65%;紧随其后的是淋巴细胞(小:12.02%;大:8.80%)以及嗜中性粒细胞(15.54%);而单核细胞最少,仅4.99%。在中华沙塘鳢的白细胞大小上,嗜中性粒细胞的体积最大,其细胞大小为(16.62±1.34)μm×(14.27±2.09)μm,细胞核大小为(11.03±0.98)μm×(8.61±0.64)μm;血栓细胞最小,其细胞大小为(9.26±0.95)μm×(8.48±0.79)μm,细胞核大小为(8.86±0.92)μm×(7.22±0.77)μm。本研究还分析了中华沙塘鳢的外周血细胞特征,结果表明,这些血细胞特征与其底栖生活习性相适应。
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