低温酶在理论研究和工业应用上的双重意义使其成为近年来研究的热点。低温酶大都由低温微生物产生，从低温环境中开发有价值的产酶微生物对丰富低温酶资源具有重要意义。本论文通过Tween-80平板法与橄榄油油脂同化平板法的结合从肉联厂低温冷库和家用冰箱中共筛出89株产脂肪酶的菌株，再通过p-NPP分光光度比色法复筛，证明有9株菌可产低温脂肪酶，并最终获得了一株高产低温脂肪酶菌株Lip35。在此筛选过程中，对两种初筛方法进行了比较，最终确立了一套快速、简便，精确度高的低温脂肪酶筛选方法。对菌株Lip35进行鉴定，分别在光学显微镜和扫描电镜下观察了菌体形态、大小等，对其在Tween-80平板和营养琼脂平板上的单菌落形态、大小、颜色等进行了描述；通过一系列生理生化试验及16sRNA保守序列的分析，将此菌株初步鉴定为假单胞菌（pseudomonas Lip35）。在摇瓶发酵水平上，对假单胞菌Lip35的发酵产酶条件进行了研究，确定了其最佳培养基成分及最佳培养条件。研究了不同碳源、氮源、无机盐、产物、底物等因素对假单胞菌Lip35产酶的影响，发现酵母膏、豆粕粉、NaCl、Tween-80浓度对产酶的影响较大。对酵母膏、豆粕粉、NaCl、Tween-80四因素各选取三个水平进行正交试验，确定假单胞菌Lip35产酶的最佳培养基成分为酵母膏0,9％，豆粕粉6.0％、NaCl 0.1％、Tween-80 0.5％。通过摇瓶发酵试验，确定其最佳培养条件为：摇床20℃，250 r／min，发酵培养基的起始pH为9.5，接种量为菌浊度OD₆₀₀在2.100～2.400之间的菌悬液5％（V／V），装液量为40 mL／300 mL，培养67 h。在此条件下培养，低温脂肪酶酶活力达58.9 U／mL，比优化前提高了35～40倍。对菌株Lip35的发酵粗酶液进行了酶学性质探讨，结果表明该低温脂肪酶的最适催化温度为20℃；对热敏感，60℃以上处理5 min，酶活性仅残留10％。该酶催化的最适pH 8.0，适宜催化的pH范围在7.5～8.0，较窄，属于碱性脂肪酶；在不同pH下的稳定性试验显示，该酶在pH 6.0～9.0内均较稳定。金属离子中，K⁺对酶有较大的抑制作用，使酶活性降低约50％，Ca²⁺则对酶有显著的激活作用，可将酶活性提高3倍以上，但EDTA试验证明，它并不是Ca²⁺依赖酶。