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目的:探讨肝癌细胞中脾酪氨酸激酶(Spleen Tyrosine Kinase,Syk)基因启动子甲基化的状态及其对肝细胞癌侵袭力的影响。通过检测Syk在人低转移肝癌细胞株(MHCC97L)、人高转移肝癌细胞株(MHCC97H)、人肝癌细胞株(HepG2)、人正常肝细胞株(L02)中Syk的表达;观察这四系细胞株中是否存在Syk基因启动子甲基化现象,探讨异常甲基化对肝细胞癌Syk表达的影响;应用去甲基化药物处理Syk基因甲基化阳性的细胞株,比较处理前后肝癌细胞的侵袭力改变情况。方法:体外培养人低转移肝癌细胞株(MHCC97L)、人高转移肝癌细胞株(MHCC97H)、人肝癌细胞株(HepG2)、人正常肝细胞株(L02),提取其mRNA,逆转录为cDNA,选取Syk基因特异性引物进行PCR扩增,观察上述细胞系中Syk的表达情况。运用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation Specific PCR,MSP)方法检测四种肝(癌)细胞株中Syk基因启动子的甲基化状态。应用甲基化转移酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Syk甲基化阳性的细胞株,MSP检测处理前后Syk基因的表达变化。运用Transwell小室法检测Syk基因甲基化阳性的肝癌细胞株,比较5-Aza-CdR处理前后的穿膜细胞数,作为评价肝癌细胞体外浸润能力的指标。结果:RT-PCR检测显示L02、MHCC97L表达Syk mRNA,而MHCC97H、HepG2不表达Syk mRNA。MSP检测显示L02、MHCC97细胞Syk基因甲基化阴性,而MHCC97H、HepG2细胞Syk基因甲基化阳性。甲基化阳性的MHCC97H、HepG2细胞株经5-Aza-CdR处理后, Syk基因异常甲基化状态得到逆转,Syk基因恢复正常表达状态。Transwell小室检测结果表明5-Aza-CdR处理后,MHCC97H、HepG2细胞的浸润能力与迁移能力均显著下降(P < 0. 001)。结论:1.肝细胞癌细胞中存在Syk基因的表达缺失,Syk的表达缺失与启动子甲基化有关;2.在肝癌细胞株中,高转移潜能的肝癌细胞株易出现Syk的异常甲基化及表达缺失,Syk基因启动子甲基化状况与肝癌细胞株的侵袭力相关,表明Syk基因可抑制肝癌细胞株的体外浸润能力;3. 5-Aza-CdR等去甲基化药物可有效逆转Syk基因的甲基化状态。