丙型肝炎是一种持续性感染的世界性医学问题,丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是其致病病毒。临床方面,目前丙型肝炎尚未有有效疫苗面市,进行免疫预防,目前治疗的基础方案是联合应用聚乙二醇化干扰素α与利巴韦林,但基因型的多样性导致了标准治疗效果并不显著。中药、天然药物在传染性疾病的治疗方面拥有渊源的历史,部分天然活性药物在慢性丙型肝炎的治疗方面发挥了重要的作用。本课题以此为出发点构思,通过建立一种体外抗HCV病毒的细胞筛选模型用于评价潜在抗HCV病毒化合物的生物活性。以此为基础采用高通量筛选的方法从天然中草药化合物库中获到一种可显著抑制HCV病毒活性的化合物A,通过量效关系的考察确定化合物A的IC50为6.34μM,同时通过观察报告基因EGFP的荧光强度,证实了随着化合物A浓度的升高,病毒感染的阳性率有明显下降;通过实验验证在效应浓度范围内化合物A对细胞的无毒性作用,初步证实了该化合物的安全性。在此基础上,通过对HCV非结构蛋白NS3蛋白的抑制率的检测,初步验证了化合物A可能是通过抑制NS3蛋白的丝氨酸蛋白酶及解旋酶活性,抑制其参与病毒蛋白翻译后加工的机制,从而阻碍了丙型肝炎病毒的复制,在细胞水平上初步阐明了化合物A抑制HCV活性的作用机理。综上所述,本研究建立了一种高效的抗HCV化合物筛选平台,并筛选获得一种安全有效的抗病毒药物化合物A,在细胞水平上初步阐明了其对HCV病毒的抑制作用及作用机理,在探寻控制HCV病毒传播及在丙肝慢性疾病的预防和治疗方法的研究方面有着重要意义。