实时荧光定量PCR法检测人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因的表达

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目的:研究β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞内的表达变化。方法:培养MG63细胞株,用不同浓度的wnt3a蛋白或者不同时间段用相同浓度的wnt3a刺激MG63细胞,用实时荧光定量PCR技术在mRNA水平检测β-catenin在MG63细胞内的表达变化。培养MG63细胞株,用相同浓度的wnt3a蛋白刺激,分别在不同的天数计细胞个数,比较刺激组与空白组的细胞数目的差别。结果:不同浓度的wnt3a蛋白(Ong/ml,50ng/ml,100ng/ml,150ng/ml,200ng/ml)刺激MG63细胞,细胞内β-catenin表达有变化;浓度为100ng/ml时,细胞内β-catenin表达水平最高。用100ng/ml的wnt3a刺激细胞不同的时间段0min,30min,1h,3h,6h,12h,24h结果分析beta-catenin表达量最高的时间段为6h。比较空白组与刺激组细胞增殖的区别,刺激组细胞增殖程度明显高于空白组。结论:β-catenin基因在人骨肉瘤wnt3aMG63细胞内的表达变化,证明wnt/β-catenin信号通路对人骨肉瘤MG63细胞有重要的调控作用。
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