论文部分内容阅读
随着社会的老龄化,围绝经期综合征的发病率也随之升高,神经内分泌免疫功能的紊乱被认为是其发病的根本。目前国内外针对围绝经期综合征主要采用激素替代疗法进行治疗,但因其副作用及禁忌症限制了其在临床上的应用。近年来因中药治疗围绝经期综合征副作用小,而疗效显著,已逐渐成为围绝经期综合征的主要治疗方法。中药更年春方(GNC)是我院根据中医理论及多年临床实践而研制,在治疗围绝经期综合征方面已取得良好疗效,因此有必要研究GNC对围绝经期综合征的治疗机制。本研究拟通过体外实验研究,从神经内分泌免疫功能角度出发,探讨GNC对围绝经期综合征的治疗机制,为GNC用于临床提供有效的科学依据。第一部分中药更年春方对去势大鼠学习记忆能力的影响目的：观察GNC对去势大鼠学习记忆能力的影响,探讨GNC对神经系统功能的影响机制。方法：本研究实验分7组。3月龄SD雌性大鼠去势(OVX)后随机分组,灌服中药复方GNC作为OVX+GNC组(实验组),灌服戊酸雌二醇作为OVX+E2组(阳性对照组),灌服生理盐水作为OVX+NS组(模型组)；手术过程相同但不去势的SD雌性大鼠即假手术(Sham)后随机分组,灌服GNC为Sham+GNC组,灌服生理盐水为Sham+NS组；未行任何手术的SD雌性大鼠即正常(NC)后随机分组,灌服生理盐水作为NC+NS组,不灌任何药物大鼠作为NC组。灌药3个月后经Morris水迷宫实验检测各组大鼠的学习记忆能力。结果：(1)在Morris水迷宫实验中定位航行能力测试(place navigation performance, PNP)中,OVX+NS组与NC+NS组、NC组比较,逃避潜伏期(escape latent period, ELP)时间明显延长(P<0.05); OVX+GNC组、OVX+E2组与OVX+NS组比较,ELP时间明显缩短(P<0.05); Sham+GNC组与Sham+NS组、NC组比较ELP时间明显延长(P<0.05); OVX+E2组与OVX+GNC组比较,ELP无明显差异(P<0.05)。(2)在空间探索能力测试(spatial probe performance, SPP)中,OVX+NS组与NC+NS组及NC组比较,穿越平台次数明显减少(P<0.05); OVX+GNC组、OVX+E2组与OVX+NS组比较,穿越平台次数明显增多(P<0.05)；Sham+GNC组与Sham+NS组及NC组比较,穿越平台次数明显减少(P<0.05)；OVX+E2组与OVX+GNC组比较,穿越平台次数无明显差异(P<0.05)。在探索轨迹图中,OVX+NS组与NC+NS组及NC组比较,探索轨迹呈现无规律分布；OVX+GNC组、OVX+E2组与OVX+NS组比较,探索轨迹明显集中分布于平台所在位置附近；Sham+GNC组与Sham+NS组及NC组比较,探索轨迹呈现无规律分布；OVX+E2组与OVX+GNC组比较,探索轨迹的分布无明显差异。结论：去势会导致大鼠学习记忆能力减退；GNC可提高去势大鼠的学习记忆能力,效果与E2类似；未去势大鼠灌服GNC反而导致学习记忆能力减退。第二部分中药更年春方对去势大鼠神经递质、细胞因子、瘦素及子宫内膜的影响目的：观察GNC对去势大鼠神经内分泌免疫功能的影响,探讨GNC对围绝经期综合征的治疗机制。方法：本研究实验分8组。3月龄SD雌性大鼠去势(OVX)后随机分组,灌服中药复方GNC高剂量(OVX+GNCH组)、灌服中药复方GNC颗粒制剂中剂量(OVX+GNCM组)、灌服中药复方GNC颗粒制剂低剂量(OVX+GNCL组)作为实验组,灌服戊酸雌二醇高剂量(OVX+EH组)、灌服戊酸雌二醇低剂量(OVX+EL组)作为阳性对照组,灌服双蒸水(OVX+D组)作为模型组。手术过程相同但不去势的SD雌性大鼠即假手术(Sham)随机分组,以灌服中药复方GNC中剂量作为Sham+GNCM组、灌服双蒸水作为Sham+D组。灌药30天各组大鼠测体重后,经心脏采血处死后,取大鼠大脑后分离下丘脑,检测神经递质(NE、DA、5-HT、5-HIAA)水平；取大鼠血清检测细胞因子(IL-1β、IL-6、 TNF-α、IL-2、IFN-γ)水平、Leptin水平、E2水平；取大鼠子宫检测子宫内膜厚度。结果：(1) OVX+D组与Sham各组比较,大鼠下丘脑内神经递质NE、DA含量明显降低(P<0.05),5-HT、5-HIAA含量、5-HT/NE、5-HT/DA比值明显升高(P<0.05); OVX+GNCH组、OVX+GNCM组、OVX+EH组与OVX+D组比较,下丘脑内神经递质NE含量明显降低(P<0.05)。OVX+GNC各组、OVX+E各组与OVX+D组比较,大鼠下丘脑内神经递质DA含量明显升高(P<0.05),5-HT、5-HIAA含量明显降低(P<0.05)、5-HT/NE、5-HT/DA比值明显下降(P<0.05)；OVX+GNC各组与OVX+E各组比较,大鼠下丘脑神经递质之间均无明显差异。OVX+GNCH组、OVX+EH组与OVX+GNCm组、OVX+GNCL组比较,大鼠下丘脑内神经递质5-HT含量明显降低(P<0.05),5-HT/NE,5-HT/DA比值明显下降(P<0.05)。(2) OVX+D组与Sham各组比较,血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05),血清IL-2.IFN-y水平明显降低(P<0.05); OVX+GNC各组、OVX+E各组与OVX+D组比较,血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低(P<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平明显升高(P<0.05); OVX+GNC各组与OVX+E各组比较,血清细胞因子的含量之间均无明显差异。OVX+GNCH组与OVX+GNCL组比较,血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05); OVX+EH组与OVX+EL组比较,血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。(3)灌药前各组体重之间无明显差异。灌药后OVX+D组与Shad各组比较,体重明显增加(P<0.05),血清leptin水平明显升高(P<0.05); OVX+GNC各组、OVX+E各组与OVX+D组比较,体重明显降低(P<0.05),血清leptin水平明显降低(P<0.05); OVX+GNC各组与OVX+E各组比较,体重及血清leptin水平均无明显差异。(4) OVX+D组与Sham各组比较,血清E2水平明显降低(P<0.01),子宫内膜厚度明显变薄(P<0.01); OVX+GNC各组与OVX+D组比较,血清E2水平无明显差异,子宫内膜厚度无明显差异；OVX+E各组与OVX+D组、OVX+GNC各组比较,血清E2水平明显升高(P<0.01),子宫内膜厚度明显增厚(P<0.01)。结论：GNC可调节去势大鼠下丘脑神经递质的分泌,增强其免疫功能,调节其体质代谢的作用,但却不会增加去势大鼠血清E2水平及子宫内膜厚度。