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黄连及其主要成分小檗碱具有抗菌、抗炎和抗氧化等多种功能,临床应用广泛。但在疾病治疗过程中,黄连和小檗碱也表现出一些毒性反应,因此国内已有学者对黄连的基础毒性进行了相关研究,但是关于黄连和小檗碱的细胞毒性作用未见报道。故本试验以BRL细胞、NRL细胞和L929细胞为研究对象,从细胞水平上探讨黄连和小檗碱的安全性,旨在揭示黄连和小檗碱的细胞毒性及其作用机制,为黄连在临床上的合理应用提供参考。试验首先将黄连、小檗碱分别倍比稀释成10个不同浓度梯度,然后与培养24h的单层BRL细胞、NRL细胞和L929细胞共培养,采用CCK-8法检测不同浓度的2种药物对3种细胞增殖(或抑制)的影响,依据CCK-8检测结果,选取对细胞具有较高抑制率的药物浓度(对3种细胞的抑制率约为75%,以下简称“高剂量”),较低抑制率的药物浓度(对3种细胞的抑制率约为25%,以下简称“中剂量”)和不产生抑制作用的药物浓度(对3种细胞的抑制率约为0%,以下简称“低剂量”)分别作用于三种细胞,用Annexin V-FITC和PI双染检测细胞凋亡率,JC-1染色检测细胞线粒体膜电位变化。结果如下：1.CCK-8检测结果显示,黄连浓度在高于019mg/mL、1.56mg/mL、1.56mg/mL时,分别对BRL细胞、NRK细胞、L929细胞的增殖有抑制作用,小檗碱浓度在高于00338mg/mL、0.0338 mg/mL、0.0169 mg/mL时,分别对三种细胞增殖有抑制作用；黄连浓度低于01 mg/mL、0.78mg/mL、0.78 mg/mL时,分别对BRL细胞、NRK细胞、L929细胞的增殖有促进作用,小檗碱浓度低于0.0169 mg/mL、0.0169 mg/mL、0.0084 mg/mL时,分别对三种细胞增殖有促进作用。黄连和小檗碱对3种细胞的IC50均为NRK细胞>L929细胞>BRL细胞；黄连和小檗碱对3种细胞毒性反应分级结果显示两种药物均对BRL细胞的毒性最大。2.流式细胞术检测细胞凋亡试验结果显示,高、中、低剂量黄连诱导细胞的总凋亡率(%),BRL细胞分别为3.115±0.019、1.659±0.017、0.055±0.001,NRK细胞分别为5.040±0.030、3.458±0.025、1.972±0.015,L929细胞分别为5.980±0.055、4.790±0.040、3.300±0.079；高、中、低剂量小檗碱诱导细胞的总凋亡率(%)BRL细胞分别为3.493±0.006、1.923±0.013、0.864±0.009,NRK细胞分别为4.906±0.030、2.344±0.015、1.958±0.015,L929细胞分别为5.554±0.021、4.790±0.040、3.784±0.045；以上结果显示黄连和小檗碱均能诱导BRL细胞、NRK细胞、L929细胞发生凋亡,细胞凋亡率均随药物浓度降低而下降,呈剂量依赖性。3.JC-1荧光染色法检测细胞线粒体膜电位变化结果显示,高、中、低剂量黄连诱导细胞的线粒体膜电位红绿荧光比值BRL细胞分别为0.336±0.036、2.479±0.025、6.114±0.053,NRK细胞分别为0.669±0.031、1.586±0.044、4.484±0.0312,L929细胞分别为1.070±0.064、1.260±0.031、1.700±034;高、中、低剂量小檗碱诱导细胞的线粒体膜电位红绿荧光比值BRL细胞分别为0.388±0.023、2.624±0.009、9.281±0.055,NRK细胞分别为0.540±036、0.911±0.028、3.170±0.042,L929细胞分别为0.801±0.042、1.088±0.037、1.420±0.042；以上结果显示黄连和小檗碱均能引起BRL细胞、NRK细胞、L929细胞线粒体膜电位改变。结论：黄连和小檗碱对BRL细胞、NRK细胞和L929细胞均有一定的毒性作用,其中对BRL细胞毒性最大,对NRK细胞毒性最小,对L929细胞的毒性中等,并且较高剂量的黄连、小檗碱均可引起细胞早期凋亡和线粒体膜电位改变。