【摘 要】
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利用重组PCR技术,构建了霍乱毒素B亚基(CholeratoxinBsubunit,CTB)与A组轮状病毒地方株T114VP6全基因的融合cDNA片段,将其克隆到原核表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET-CT
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利用重组PCR技术,构建了霍乱毒素B亚基(CholeratoxinBsubunit,CTB)与A组轮状病毒地方株T114VP6全基因的融合cDNA片段,将其克隆到原核表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET-CTBV6,转化E.coliBL21(DE3)细胞.分别用兔抗CT的抗体和豚鼠抗A组轮状病毒Wa株的高价免疫血清进行WesternBlot检测,证明融合蛋白CTB-VP6保留了天然霍乱毒素B亚基及轮状病毒VP6的抗原性.G<,M1>-ELISA检测表明,复性后的融合蛋白具有与神经节苷酯G<,M1>结合的能力.同时将T114VP6全基因克隆到原核表达载体pET30a(+)中,构建成重组质粒pET-VP6.经Ni-NTA亲和层析柱纯化后用豚鼠抗A组轮状病毒的高价免疫血清进行WesternBlot检测,证实表达的蛋白为轮状病毒VP6蛋白.
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