在畜牧业生产中,青霉素类药物常用于奶牛疾病的治疗、预防及用作饲料添加剂,但它们的残留和毒性会对食品安全、人体的健康造成潜在危害,因此,青霉素类药物在牛乳等动物性食品中的残留问题日益受到关注。目前检测青霉素类药物残留的主要方法有 HPLC、TTC 法等,这些方法虽然非常敏感,但费时、耗资大、操作繁琐。 本研究分别以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为蛋白质载体,采用碳二亚胺法(CDI)将半抗原青霉素钠(PEN)分别与 BSA、OVA 偶联,合成了完全抗原 PEN-EDC-BSA 和 PEN-EDC-OVA。用合成的完全抗原免疫大白兔获得抗青霉素免疫球蛋白(IgG)。以不同浓度的 IgG 和葡萄球菌 A 蛋白(SPA)相偶联,用以制备 SPA 诊断液,并做葡萄球菌 A 蛋白-协同凝集试验(SPA-COA)检测青霉素残留。通过试验得出以下结论:(1)SPA 最佳浓度为 5%;(2)IgG 和 SPA 稳定液最佳比例为 1︰5;(3)PBS 稀释液以 0.01M pH 7.4 为最好;(4)初步确定 SPA-COA 最低检测限为 10μg/L;(5)本研究建立的方法对牛奶中 PEN 残留进行检测具有一定的实用意义。