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本课题对IBD免疫监测的间接ELISA方法进行了标准化研究，并制备了相应的诊断试剂盒。 在酶标抗体的制备方面，本研究对几种提纯IgG的方法（硫酸铵法、盐酸-硫酸铵法、醋酸-硫酸铵法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-辛酸法）作了比较。SDS-PAGE电泳和蛋白含量测定分析表明，辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-辛酸法提取的IgG纯度均较高，且硫酸铵-辛酸法提取的蛋白含量高于辛酸硫酸铵法。采用改良过碘酸钠法将提纯的兔抗IBDV IgG和兔抗鸡IgG进行辣根过氧化物酶（HRP）标记，效果比较理想，二者工作浓度分别为1：1000，1：1200。 本研究探讨了MTT比色法用于检测病料中IBDV在细胞培养物中增殖情况的应用，结果表明，MTT可用作细胞培养物中病毒是否增殖的指示系统，可用于IBDV在CEF上初次增殖时的检测。通过对IBDV(D78和Hb株)在3种宿主系统（vero细胞、CEF、鸡胚）中的增殖情况的比较，结果发现，IBDV在vero细胞（非洲绿猴肾细胞）的增殖周期较CEF长（一般为4～5天）；但vero细胞增殖的病毒，其毒价和蛋白含量均高于CEF和鸡胚增殖的相应病毒。因此选用异源的咖细胞大量增殖IBDV，并采用不同的方法进行纯化比较。纯化结果表明经Sephadox G-200分子筛层析可部分纯化抗原，但操作烦琐，费时费力；而氯仿抽提和聚乙二醇（PEG）6000沉淀法制备浓缩ELISA抗原，简单易行，更适于基层单位的应用。 经反复试验，本研究确立了间接ELISA检测IBD抗体的最佳反应条件，即：抗原包被浓度2.8μg/孔，用含0.5％牛血清白蛋白（BSA）的磷酸盐缓冲液（内含0.05％吐温-20）作为封闭液，待检血清最佳稀释度为1：100，孵育条件均以37℃ 60min为佳。对不同日龄免疫鸡群24份血清样品进行了检测，从而确立了ELISA效价（ET）的对数值（10gET）与血清P／N值的线性回归分析，得直线方程y=10.1029-3.0461x（r=0.9404），进而可通过血清单一稀释度的P／N值来计算样品的效价。根据对32份SPF鸡阴性血清检测结果的平均值制定了间接ELISA判定标准。在此基础上研制出IBD间接ELISA快速诊断试剂盒，并对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品的比较、保存期等进行了全面、详细的研究。结果表明研制的试剂盒在-20℃保存至6个月时各项性能都很好。该试剂盒与进口试剂盒对同样血清样品检测，符合率为86.7％。间接ELISA试剂盒与琼扩试验的符合率为92.5％。该试剂盒可对大量血清样品进行检测，操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、快速，更适合于大型鸡场IBD免疫抗体水平的监测及现地疫病诊断等需要。