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【目的】克隆淡色库蚊核糖体蛋白S4(RPS4)基因的全长序列，并研究其与蚊抗药性的相关性。【方法】根据本试验室抑制性差减杂交结合cDNA芯片筛选获得的EST片段(GenBank accession no．BE247804)设计引物，分别与载体序列配对，通过PCR的方法，从淡色库蚊抗性品系中分别扩增出目的基因的5′和3′末端，分别T／A克隆于pGT载体，转化、测序、对位拼接获取全长序列。用Clustal X、Clustal W等生物信息学软件对编码的氨基酸序列进行分析。用实时荧光定量PCR验证RPS4基因在淡色库蚊抗性、敏感品系不同发育阶段中的差异表达。应用基因重组方法构建RPS4基因的原核和昆虫表达载体；将重组的昆虫表达载体转入蚊C6／36细胞，经药物筛选获得稳定转染的细胞系，RT-PCR鉴定目的基因表达；用~3H-TdR掺入法检测稳定表达的单克隆细胞对溴氰菊酯的敏感性。【结果】获得淡色库蚊RPS4基因的全长cDNA序列，总长度为1002 bp，开放阅读框为789 bp，编码262个氨基酸(GenBank accessionno．DQ647667)。淡色库蚊RPS4与埃及伊蚊、冈比亚按蚊、果蝇的RPS4同源性分别为96％、91％、78％。荧光定量PCR结果显示，RPS4基因在淡色库蚊抗性和敏感品系的不同发育阶段均有表达；在蛹和成虫发育阶段，与敏感品系相比，RPS4基因在抗性品系中高表达(P＜0.01)。成功构建了RPS4基因的原核和昆虫表达载体。~3H-TdR掺入法结果显示，在一定浓度的溴氰菊酯处理下，转染RPS4基因的细胞存活率与对照组相比，无显著性差异(P＞0.05)。【结论】本研究获得了淡色库蚊RPS4基因的全长cDNA序列。该基因在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中(蛹和成虫期)高表达，提示该基因与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关，但其在细胞对抗溴氰菊酯的毒性作用中未发现有保护作用。