肝素抑制LPS诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达

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目的:探讨普通肝素(UFH)是否抑制脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。  方法:体外培养HUVECs传代至第4~5代用于实验。将传代后的细胞随机分为4组:正常对照组;LPS刺激组(LPS10μg/ml);普通肝素(UFH)+LPS组(UFH10 U/ml+LPS10μg/ml);普通肝素组(UFH10 U/ml)。普通肝素+LPS组于LPS刺激前15min加入10 U/ml的普通肝素,后加入LPS对HUVECs进行刺激。各组分别于LPS刺激后的6h及12h收集HUVECs并提取各自细胞组的总RNA,将所提取的总RNA逆转录为cDNA后,应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-timequantative polymerase chain reaction,qRT-PCR)的方法检测各组细胞中ICAM-1mRNA的水平变化,并依据数据结果进行组间比较分析。  结果:与正常对组相比较,LPS刺激组ICAM-1 mRNA的表达水平明显增加,6h达到高峰,12h其表达呈现下降趋势(6h:15.91±1.64比7.59±0.93;12h:12.00±0.51比6.59±0.29)。与LPS组相比较,普通肝素预处理组明显降低6h及12hICAM-1 mRNA的表达水平(6h:10.59±1.24比15.91±1.64,12h:8.05±0.89比12.00±0.51)。差异具有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组相比较,普通肝素组ICAM-1 mRNA的表达水平无明显变化(6h:7.72±0.89比7.59±0.93;12h:5.74±1.38比6.59±0.29)。差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:脂多糖刺激下HUVECs表达ICAM-Ⅰ mRNA的水平明显增加,6h达到高峰之后呈逐渐下降趋势。普通肝素降低了LPS刺激下HUVECs表达ICAM-ⅠmRNA的水平,提示肝素抑制LPS诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达,对LPS刺激的内皮细胞损伤具有保护作用。
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