【摘 要】
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该项目通过对黄松的组织培养和微体快繁技术的研究,在离体培养条件下,以美国黄松成熟胚为外植体获得了再生小植株,初步探索了美国黄松微体快繁的有效途径,为其工厂化育苗提供
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该项目通过对黄松的组织培养和微体快繁技术的研究,在离体培养条件下,以美国黄松成熟胚为外植体获得了再生小植株,初步探索了美国黄松微体快繁的有效途径,为其工厂化育苗提供了一定的实验和理论基础.同时为进一步通过遗传操作获得转基因植株,从而改良松树品种提供必要前提和条件.获得了以下主要结论:(1)胚是美国黄松(Pinus ponderosa)微体快繁最佳的外植体,胚的生理状态对组织培养具有重要的影响.(2)将经浸泡充分吸胀后剥去种皮的美国黄松种子,用750g Kg<-1>乙醇浸泡20s,再用1g Kg<-1>HgCl<,2>消毒10min,无菌水冲洗4次,于无菌条件下用小解剖刀剥去胚乳,取出成熟胚接种到不定芽诱导培养基上,极少染菌.(3)培养基的基本成分对美国黄松成熟胚愈伤组织形成有明显的作用.高盐浓度的培养基对培养过程中愈伤组织数量及鲜重增加有益,降低培养基的盐浓度,会减少其愈伤组织的生长.(4)基本培养基是美国黄松成熟胚离体培养形成不定芽的关键,GD最好,SH次之,MS和N<,6>则不适用.(5)单独使用细胞分裂素6-BA诱导美国黄松成熟胚形成不定芽.6-BA能促进美国黄松成熟胚和愈伤组织不定芽的形成,但对芽的生长有一定的抑制作用.NAA不利于美国黄松成熟胚不定芽的诱导.(6)美国黄松成熟胚离体培养不定芽形成有2种途径:①子叶直接形成不定芽;②子叶经愈伤组织再分化形成不定芽.(7)GD、SH对不定芽的生长具有促进作用;SH+IAA1.0mg·L<-1>对不定芽的生长具有较好的促进作用;1/2SH、1/2SH+NAA.5mg·L<-1>对不定芽的生长具有很好的促进作用.培养基中加适量活性炭有利于不定芽的生长与伸长.(8)基本培养基的使用浓度对美国黄松不定芽生根至为重要,GD、SH培养基不能诱导美国黄松不定芽生根,降低大量元素的浓度(SH→1/2 SH)和蔗糖浓度(2﹪→1﹪)可诱导不定芽生根,1/2 SH对不定芽生根的诱导率为2.2﹪,1/2 SH++NAA0.5mg·L<-1>对不定芽生根的诱导率为3.3﹪.
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