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很多因素可以导致药物反应个体差异,例如年龄、性别、疾病状态和遗传等。遗传药理学研究发现药物代谢酶、受体和转运体的遗传多态性是药物反应个体差异的决定因素。普拉克索是临床用于治疗帕金森病的多巴胺受体激动剂。它为新型的非麦角碱类多巴胺受体激动剂,对多巴胺D2类受体具有高度选择性,对D2类受体的亲和力依次为D3>D2>D4。目前对早期的帕金森病患者提倡首选多巴胺受体激动剂治疗,晚期可与左旋多巴合用,这样可以尽量延缓左旋多巴开始治疗的时间和减少左旋多巴的剂量,以避免由于长期使用左旋多巴导致的疗效衰退以及引起症状波动、运动障碍和精神症状等不良反应,而且普拉克索对多巴胺神经有保护作用,可大大延缓病情的发展。普拉克索的药代动力学特点为吸收迅速,约2小时达到血药浓度高峰,生物利用度高于90%,食物对普拉克索的吸收影响很小,其在体内分布广泛,表观分布容积约为500L,与血浆蛋白的结合率约为15%,半衰期在健康的年轻人平均为8小时,在老年人大概为12小时。普拉克索的消除途径主要是通过肾脏,90%以原型从肾脏分泌排泄。研究表明普拉克索在肾脏的分泌主要由有机阳离子转运体2(organic cation transporter 2,0CT2)介导。但普拉克索在临床实际应用中存在显著的个体差异。由于它不被酶代谢,所以有机阳离子转运体2和它作用的靶受体DRD2和DRD3的遗传多态性是导致它个体差异的重要因素。OCT2是肾脏表达最丰富的一种有机阳离子转运体,其底物包括体内多种生物活性物质和多种药物如：多巴胺、二甲双胍、金刚烷胺、西咪替丁等。近年来,OCT2基因上已陆续发现多个单核苷酸多态性(SNP),但很多SNP都存在显著的种族差异性,例如Leabman的研究发现M165工和R400C两种突变只出现在非裔美国人中,K432Q突变在非裔美国人和墨西哥裔美国人存在,而A270S突变在不同种族中都存在,并且频率高达12.7%。进一步功能研究显示,M165I和R400C两种突变显著降低了蛋白的最大转运速率。R400C和K432Q突变显示出对抑制剂TBA的敏感性增强,而突变频率最高的A270S突变对抑制剂TBA的敏感性减弱。韩国研究者IS Song的研究发现A270S突变导致转运体最大转运速率Vmax与野生型相比显著降低,在健康受试者的临床实验发现,该突变影响二甲双胍的药代动力学特征,突变后AUC和Cmax都显著升高,CL／F显著降低,并且呈现基因剂量效应。多巴胺受体(DR)属于G蛋白偶联受体超家族。目前已知有五种DR(D1-D5),根据生化反应和药理生理特性的不同,将五种DR分为D1类和D2类受体。D1类受体包括D1和D5,兴奋时激活腺苷酸环化酶,使cAMP水平增加；D2类受体包括D2、D3和D4,兴奋时抑制腺苷酸环化酶,使cAMP水平降低。围绕DR和帕金森病的研究主要集中在D2和D3。多巴胺受体D2 (DRD2)存在以下几个突变：启动子区-141C Ins/Del突变；Taq1A RFLP;内含子2中的(CA)n二核苷酸短串联重复多态性；及三个错义突变：Ser311Cys, Pro310Ser, Val96Ala。功能研究显示,在Taq1A多态性位点携带A1等位基因的个体其纹状体DRD2受体密度降低,并且影响与底物结合的特异性；DRD3基因位于3号染色体。目前已发现的突变有Ser9Gly和位于第5内含子的MspI RFLP。Ser9Gly突变位于DRD3蛋白胞外的氨基端,对蛋白嵌入胞膜有影响,后又有研究表明9Gly突变增强受体与多巴胺的亲和力。基于以上研究背景,本课题旨在查明OCT2808G>T突变在健康人和帕金森患者的分布特征,该突变是否与帕金森病的遗传易患性相关；通过严谨的临床实验设计查明OCT2808G>T突变在健康受试者对治疗帕金森病药物普拉克索药代动力学的影响；通过严谨的临床实验设计,研究DRD2和DRD3常见遗传突变对普拉克索在帕金森病人药效的影响。本课题的主要研究结果如下：1.在汉族健康志愿者,OCT2808G>T突变的T等位基因频率为11.4%；在原发性帕金森病患者,突变的T等位基因频率为3.1%,显著低于健康人群。表明OCT2808G>T突变与帕金森病的遗传易患相关,该突变对帕金森病来说可能是一遗传保护因子。2.建立简单、灵敏的LC-MS/MS方法检测体内盐酸普拉克索血药浓度。3.OCT2808G>T基因多态性影响普拉克索的药代特点。携带突变等位基因的受试者组普拉克索的Cmax和AUC显著高于野生型纯和子组,口服清除率则显著低于野生型纯和子组。4.在中国的帕金森患者中,DRD3 Ser9Gly多态性和普拉克索的疗效显著相关,突变后有效率显著降低,DRD2 Taq1A多态性与普拉克索的疗效无显著相关。但需要更大范围和多剂量的临床试验进一步验证多巴胺受体遗传多态性对普拉克索疗效的影响。总之,本项目从分子水平、健康受试者和临床病人水平对普拉克索的药物反应个体差异提供了遗传药理水平的解释,为临床合理应用普拉克索提供了实验依据和理论指导,服用普拉克索的帕金森患者先行进行OCT2、DRD2和DRD3基因型检测可能在获得更好的疗效及避免不良反应等方面有优势。