外源性硫化氢对心肺复苏后血脑屏障的影响

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【目的】观察硫化氢(NaHS作为供体)对心肺复苏后大鼠血脑屏障是否具有保护作用。  【方法】 SD雄性大鼠随机分为3组:(1)手术对照组:进行心搏骤停前的一切操作(如麻醉、气管插管、股动静脉置管等);(2)心肺复苏(CPR)组:经皮电刺激心外膜法制备心搏骤停模型(心脏骤停6分钟),复苏前1分钟,经股静脉置管内注射生理盐水(1.67ml/kg),成功进行心肺复苏后持续泵入生理盐水(5ml/kg/h)3小时;(3)心肺复苏+硫氢化钠(CPR+NaHS)组:经皮电刺激心外膜法制备心搏骤停模型(心脏骤停6分钟)并成功复苏,复苏前1分钟,经股静脉置管内注射硫氢化钠(0.5mg/kg),此后持续泵入硫氢化钠(1.5mg/kg/h)3小时。心肺复苏后24小时观察大鼠生存情况,使用NDS评分评价各组大鼠神经功能损伤情况。处死大鼠,取大鼠脑进行后续研究。①大鼠脑组织的含水量;②伊文氏蓝染色法检测血脑屏障损伤;③ western blot法检测脑组织中MMP-9、Occludin、ZO-1表达的变化;④透射电镜下观察血脑屏障的变化。  【结果】①与假手术组相比,CPR组与CPR+NaHS组大鼠在心肺复苏成功后24小时NDS评分均明显下降,与CPR组相比,NaHS干预的大鼠NDS评分有明显提高;②与假手术组相比,CPR组与CPR+NaHS组大鼠脑含水量都有增加,但是CPR+NaHS组脑水肿较CPR组减轻;③与假手术组相比,复苏后成功后,CPR+NaHS组和CPR组脑组织中均有伊文氏蓝渗入,而NaHS干预后的大鼠伊文氏蓝渗入量明显减少;④Western blot结果显示,与假手术组相比,CPR组与CPR+NaHS组血脑屏障结构蛋白Occludin和ZO-1表达量都有下降,CPR+NaHS组的下降程度较CPR组减轻;CPR组与CPR+NaHS组大鼠复苏后脑内MMP-9都有增加,与CPR组相比,CPR+NaHS组的增加程度减轻;⑤电镜下显示,复苏后24小时,CPR组与假手术组相比紧密连接消失、中断,内皮细胞肿胀、线粒体受损,而CPR+NaHS组紧密连接及内皮细胞的损伤程度较CPR组轻。  【结论】外源性硫化氢可降低心肺复苏后血脑屏障的损伤,抑制心肺复苏后大鼠脑组织内MMP-9的表达。
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