细香葱再生体系的建立

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liqiuru1025
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细香葱(Allium schoenoprosum)为百合科(Liliaceae)葱属多年生草本植物。本研究以茎盘为材料,重点研究了外植体的灭菌体系、外植体取材大小、激素配比及浓度对细香葱不定芽和根诱导的影响,初步建立了一套完整的细香葱组织培养的技术体系。在灭菌的过程中,将15种灭菌方法进行了对比,实验表明:无论采用0.1%HgCl2(Tween 20)一次灭菌,还是用0.1%HgCl2(Tween 20)灭菌后,再用2%NaClO二次灭菌,以及用农用链霉素处理,都不能达到灭菌效果。另外,在用0.1%HgCl2(Tween 20)进行处理时,随着处理时间的延长,外植体死亡率逐渐增大。因而对于茎盘而言,只能在培养基中添加青霉素来抑制内生菌的滋生,但浓度要控制在400单位/L。茎盘的大小是影响不定芽诱导的一个主要因素,茎盘块过小(单独茎盘)或者过大(茎盘加叶基部0.2 cm)都不能达到增殖的目的,只有选择适当大小的茎盘(茎盘加叶基部0.1 cm)才可以。本实验对激素和基本培养基分别进行了对比,研究发现6-BA是诱导不定芽的决定因素,但是随着6-BA浓度逐渐升高,玻璃化率也逐渐升高;在不添加的NAA的培养基中也可以诱导出不定芽,但添加NAA效果更好,而且可以有效的降低玻璃化率。最终确定最佳激素浓度为:6-BA 2.0 mgL-1、NAA 0.2 mgL-1,此浓度下增殖系数为13.73。对MS、LS、B5三种基本培养基进行对比发现,由于三种培养基中硝态氮和维生素含量的不同,诱导率也有所不同,且MS诱导效果较佳。不定芽长到1.0 cm(接种20d左右)时要及时的将不定芽转接到生根培养基中,生根培养基在不加NAA的情况下可以生根,但是添加NAA后,生根条数增加,然而浓度到1.0 mgL-1时,生出的新根发黄,不利于后期植株的移栽成活,因而,最终确定了生根培养基中NAA浓度为0.5 mgL-1。待不定芽长出根后(20d左右),经过炼苗,移栽到基质中。本实验对4种基质进行对比发现在基质土中,成活率较高为83.33%。
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