目的：本研究旨在应用双向凝胶电泳结合质谱技术对供精人工授精(AID)不同结局精子蛋白组成差异进行研究,探讨精子蛋白质组学变化与妊娠结局的相关性和AID结局不同的分子生物学机制,并为精子库筛选优质精子提供分子生物学靶点,为临床治疗提供参考依据和新思路。方法：1、将1例供精人工授精连续9个不同周期失败精子作为实验组,3例供精人工授精周期成功率在50%以上精子作为对照组。2、分别收集、处理两组精液,低渗裂解法分别提取两组全精子蛋白质；3、利用双向电泳结合质谱的蛋白质组学核心技术,分离、鉴定连续数个周期AID失败精子和成功率在50%以上精子差异蛋白；4、采用Western-blot观察精液凝固蛋白-1及谷胱甘肽硫转移酶Mu3在AID不同结局精子蛋白中表达差异。结果：1、完成对精子蛋白的提取、分离,样品组在分析区域内检测到432个蛋白点,对照组有460个蛋白点,两组中共有347个匹配蛋白点,匹配率达80.32%。并找到具有差异表达的22个蛋白表达点；质谱鉴定总共鉴定出14种差异蛋白质。2、选择其中精液凝固蛋白-1及谷胱甘肽硫转移酶Mu3两个蛋白进行免疫印记验证,观察到在AID低成功率中高表达。结论：本研究利用蛋白质组学技术研究了供精人工授精不同结局精子蛋白质表达差异,发现22个差异蛋白点,并用对其中精液凝固蛋白-1和谷胱甘肽硫转移酶Mu3表达量用免疫印记法进行了验证。由于样本量的限制,差异蛋白在其中的具体作用机制尚不完全清楚,还需要进一步验证和研究,其生物学意义也有待进一步的研究。