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油菜是中国乃至全球最重要油料作物之一,提高种子含油量和改善品质是油菜研究的热点课题。发掘脂肪酸合成与积累方面的关键基因将有助于提高种子含油量和品质的研究。本课题以甘蓝型油菜高含油量品种为材料,从发育中的种子中分离出了与油脂代谢相关的基因溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase, LPAT)。总共获得了LPAT基因的11个同源基因,分别命名为：BnLPAT1-LP2.2、BnLPAT1-LP4.3、 BnLPAT1-LP5.3、BnLPAT1-LP5.4、BnLPAT2-A7、BnLPAT2-A9、BnLPAT2-C7、 BnLPAT2-C8、BnLPAT3、BnLPAT4.2、BnLPAT5.2。其中,BnLPAT1四个拷贝属于质体型LPAT,定位在叶绿体；其他拷贝基因属于微粒体型LPAT均定位与内质网。体外活性验证试验表明,质体型LPAT在大肠杆菌中具有酰基转移酶活性。BnLPAT1、 BnLPAT2和BnLPAT5.2在发育的种子中随种子的发育而表达量上升。将上述基因在拟南芥中超量表达发现,BnLPAT2-A7、BnLPAT2-C7、BnLPAT2-C8转基因株系种子亚麻酸含量相对于野生型提高了30%。BnLPAT2-A9超表达株系亚麻酸含量提高不明显,这与其他三个拷贝基因差异较大,同一基因的不同拷贝功能表现出了较大差异。BnLPAT4.2超表达株系种子油酸含量相对于野生型提高了15%,二十碳一烯酸有所下降。BnLPAT5.2超表达株系含油量与野生型相比提高了5%且萌发率不受影响。本研究结果将对提高油脂以及亚麻酸合成积累具有重要意义。本课题主要成果与发现如下：1.首创了InGate载体构建新方法,并利用红色荧光蛋白进行转基因拟南芥的拷贝数筛选,提高了实验效率,大大提高了实验效率。2.发现BnLPAT2基因能够显著提高亚麻酸在种子油脂中的比例。3.发现BnLPAT4.2在拟南芥中超表达提高油酸含量。4.发现BnLPAT5在拟南芥中对油脂积累有促进作用。