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抗生素自发现至今,一直被广泛应用于医疗领域,可以治疗多种人类和动物疾病,因此在畜牧养殖业中被广泛使用甚至造成抗生素的滥用问题,导致抗生素在牛奶、鸡蛋、猪肉等动物源性食品中的残留问题越来越严重。所以建立快速、便捷、灵敏的抗生素残留检测方法对预防食品安全问题的发生和保护人类健康具有重要意义。因此,本文针对食品中残留危害较为严重的四环素类、青霉素类抗生素,建立了以免疫侧向层析技术为基础的三种快速检测方法:(1)建立四环素传统型免疫层析试纸检测方法基于抗原抗体的特异性免疫识别和毛细侧向层析作用力检测四环素。本实验同时优化了四环素的标记抗体量、K2CO3的添加量、封闭剂种类和金纳米粒子粒径大小等实验条件,在最后优化好的各关键实验参数下,肉眼观察到的四环素检测灵敏度为10 ppb,同时在检测浓度为0.2-10 ppb之间建立的标准曲线的线性关系良好。优化的实验参数对四环素牛奶实际样品的检测也同样适用,不受牛奶基质中复杂成分的影响。(2)建立四环素预孵育增敏型免疫层析试纸检测方法以传统的免疫层析试纸为基础,加以改进,放弃使用金标垫,采用目标物与金标抗体提前孵育后直接上样的方法,通过增强标记抗体与目标物的结合效率使检测灵敏度得到显著提高。本实验同时优化了增敏抗体偶联量、偶联时K2CO3添加量、金标抗体复溶液用量等条件,确定最佳实验参数。在最优实验条件下,对四环素的最低检测限为2 ppb,灵敏度相较于传统试纸条提高了5倍,同时在检测浓度为0.05-2 ppb之间建立的标准曲线的线性关系良好。优化的实验参数对四环素牛奶实际样品的检测也同样适用,在抗生素残留快速检测领域内有巨大应用潜力。(3)四环素和青霉素增敏型免疫侧向层析试纸双重检测方法建立以预孵育增敏型免疫层析试纸为基础,同时对四环素和青霉素进行双重检测。本实验同时优化了青霉素偶联抗体量、K2CO3添加量等实验条件,在优化好的最合适的实验参数下,四环素和青霉素的最低检测限均为2 ppb,同时在检测浓度为0.05-2 ppb之间建立的双标准曲线的线性关系都良好。通过添加回收实验发现本方法同样适用于牛奶样品中残留的四环素和青霉素的同时检测,在抗生素残留多组分检测领域内有巨大潜力。