【摘 要】
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为了能够有效地防控FMD,研究该病的致病机理及机体如何抵抗病毒的复制显得尤为重要。口蹄疫病毒是一种胞杀的小RNA病毒,感染宿主细胞后,可以引起宿主细胞机制发生重要变化。
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为了能够有效地防控FMD,研究该病的致病机理及机体如何抵抗病毒的复制显得尤为重要。口蹄疫病毒是一种胞杀的小RNA病毒,感染宿主细胞后,可以引起宿主细胞机制发生重要变化。为了研究FMDV感染宿主细胞后基因表达的变化,我们利用荧光定量PCR方法检测了FMDV在细胞内的增殖情况及首次用猪IVT基因表达谱芯片上的23937个探针测定了O型FMDV感染PK-15细胞1h、2h和4h后宿主mRNA表达水平的变化。研究结果表明,在病毒感染细胞的不同时间段中共有656个基因发生变化,其中上调基因有429个,下调基因有227个。这些基因的功能涉及到细胞信号传递、免疫、代谢、细胞周期、细胞凋亡、细胞骨架与蛋白质合成等方面。研究结果还表明,一些与先天性免疫信号早期激活相关的基因如细胞内分子伴侣Hsp90在病毒早期感染过程中表达水平有明显上调。为了进一步研究FMDV感染对机体先天性免疫信号通路中的关键分子的影响,将具有不同功能的RIG-I基因的N端和C端分别克隆到pEGFP-N1表达载体(分别命名为pEGFP-RIG-N和pEGFP-RIG-C),研究了FMDV感染RIG-N或RIG-C基因过表达的PK-15细胞中的病毒增殖情况和IFN水平变化。发现RIG-N激发了信号通路中下游IFN的表达,能够抑制FMDV增殖;而RIG-C对IFN的水平变化没有影响,也不能抑制FMDV增殖,表明RIG-N基因的过表达具有抗FMDV增殖的作用。这些结果为进一步研究FMDV的致病机理,丰富小RNA病毒感染激活细胞先天性免疫信号通路的研究奠定了基础。
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