论文部分内容阅读
目的：宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,近年来宫颈癌发病有增高趋势,发病也趋于年轻化。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)在促进肿瘤增生、浸润和转移、血管生成方面都有重要作用。本研究采用病例对照研究方法,拟探讨MMP-2、MMP-9基因启动子区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与宫颈癌发病风险和浸润转移的关系,并揭示MMP-2、MMP-9基因启动子区单核苷酸多态性对各自mRNA表达水平的影响,进一步阐明宫颈癌易感性及浸润转移的分子机制,为宫颈癌的早期诊断、判断预后及临床治疗提供分子生物学的指标。方法：实验对象来源于天津中心妇产科医院2008年1月-2009年10月手术标本,分为病例组和对照组两组。提取病例组及对照组宫颈组织DNA，应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态(polymerase chain reaction-fragment length polymorphism, PCR-RFLP)分析技术,分别检测MMP-2-735 C/T、MMP-9-1562C/T两个单核苷酸多态性位点的基因型；提取病例组及对照组宫颈组织总RNA，以逆转后的cDNA为模板,通过实时荧光定量PCR对MMP-2,MMP-9基因mRNA表达进行相对定量,以发现MMP-2、MMP-9基因启动子区SNPs对其mRNA表达水平的影响。数据分析采用SPSS 16.0统计软件进行处理：病例组和对‘照组基因型频率分布做Hardy-Weinberg平衡分析；基因型和等位基因频率分布比较采用卡方检验,以非条件logistic回归方法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio, OR)及其95%可信区间(confidence interval, CI);采用效应修饰模型分析MMP-2和MMP-9基因之间的交互作用。P<0.05作为差异有显著性的标准。结果：1 MMP-2-735C/T多态性位点的CC、CT两种基因型频率在病例组和对照组中分别是77.5%、22.5%和68.0%、32.0%,TT基因型没有检测到。两组比较无统计学差异(P＞0.05)；MMP-9-1562C/T多态性位点的CC、CT、TT三种基因型频率在病例组和对照组中分别是77.8%、19.7%、2.5%和72.0%、28.0%、0%。对照组中TT基因型未检测到。两组比较无统计学差异(P＞0.05)。2与携带MMP-2-735 CT/TT、MMP-9-1562CC基因型者相比,携带MMP-2-735 CT/TT、MMP-9-1562 CT/TT基因型者,MMP-2-735CC、MMP-9-1562CC基因型者,MMP-2-735CC、MMP9-1562 CT/TT基因型者的宫颈癌发病风险分别是0.629倍(95%CI=0.095-4.177)、1.446倍(95%CI=0.479-4.360)和1.397倍(95%CI=0.346-5.353)。3本研究发现MMP-2-735C/T、MMP-9-1562C/T多态性与淋巴结转移无明显相关性(P>0.05)。4携带MMP-2-735CT基因型比携带CC基因型者MMP-2 mRNA表达量有所下降。与MMP-9-1562 CC基因型相比,MMP-9-1562 CT和TT基因型的个体MMP-2 mRNA表达量升高。但均未达到统计学意义(P>0.05)。结论：1在病例组和对照组人群中MMP-2-735 C/T多态性位点CC、CT基因型频率及C、T等位基因频率分布无差异；MMP-9-1562 C/T多态性位点CC、CT、TT基因型频率及C、T等位基因频率分布无差异。MMP-2-735C/T、MMP-9-1562C/T多态性与天津地区妇女人群宫颈癌易感性无明显相关性。2 MMP-2-735C/T和MMP-9-1562C/T两个多态性位点在宫颈癌发病过程中存在交互作用。携带MMP-2-735CC、MMP-9-1562TT/CT基因型以及携带MMP-2-735CC、MMP9-1562CC基因型者患宫颈癌的风险增高。3 MMP-2-735 C/T和MMP-9-1562C/T多态性与宫颈癌患者淋巴转移风险无明显相关性,对这两个SNPs位点与宫颈癌浸润和转移的相关性还需要进一步研究。4 MMP-2-735 C/T和MMP-9-1562 C/T多态性与各自基因mRNA表达水平无明显相关性,需扩大样本进一步研究。