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杂合性缺失是抑癌基因的失活中最早出现的一种遗传学改变,也是与肿瘤的发生发展密切关联的一种遗传学改变。杂合性缺失与抑癌基因之间的关联使得杂合性缺失的研究已被广泛应用于寻找抑癌基因。SPATA12基因是一个与人类精子发生相关的新基因,定位于染色体杂合性缺失区域3p14,提示其可能与肿瘤的发生相关。过去的研究显示,SPATA12基因作用于Hela细胞时,G0-G1期细胞数增加,而S期和M期细胞明显减少,提示SPATA12的表达能延缓肿瘤细胞由G0/G1期进入S期,可能参与了抑制细胞的增殖。基于以上研究背景和工作基础,我们认为SPATA12可能具有抑癌基因的某些特性。在本研究中我们采用组织芯片原位杂交、MTT、平板集落形成、细胞划痕实验以及RT-PCR技术等一系列细胞与分子生物学手段来了解SPATA12基因与肿瘤发生之间的相关性,及其对肿瘤细胞生长、增殖、迁移的影响以及可能机制。我们先采用高通量的组织芯片原位杂交实验对SPATA12基因在睾丸癌以及其他多器官肿瘤中的表达缺失频率进行了研究。结果显示:(1)SPATA12在不同类型睾丸肿瘤中的表达完全缺失,推测其可能是一个与男性生殖细胞肿瘤相关的候选抑癌基因。(2) SPATA12基因在卵巢、乳腺、肝脏、大脑等器官的肿瘤组织中表达完全缺失,而在黑色素瘤、胃癌、胰腺癌、结肠癌、甲状腺与前列腺癌组织中存在部分缺失。推测SPATA12基因在不同的肿瘤组织中可能存在突变从而导致其丢失频率的差异。(3)在肺肿瘤组织中,SPATA12在恶性程度最高的小细胞癌中完全不表达,而在非小细胞癌中存在部分表达丢失。在不同种类的非小细胞癌中,又以腺癌的丢失频率最高,其次为鳞癌、类癌和大细胞癌。说明SPATA12基因在肺肿瘤组织中的缺失频率与不同病理类型相关。采用MTT实验、细胞平板集落形成实验和细胞划痕实验考查了SPATA12基因对肿瘤细胞生长、增殖和迁移等生物学行为方面的影响。实验结果表明:SPATA12可明显地抑制肿瘤细胞的增殖能力、集落形成能力和细胞迁移能力。应用RT-PCR技术研究了SPATA12基因对细胞周期相关基因的影响,研究表明SPATA12基因可抑制cyclinA1的表达,使cyclinD1表达下调,而对cyclinB1和cyclinE1无显著影响。综上,SPATA12基因可能在男性生殖细胞肿瘤等癌症的发生中扮演抑制因子的角色,并通过调控细胞周期相关基因发挥作用。