养阴健脾散毒方对人胃癌SGC-7901细胞AKT信号通路影响的实验研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:MARRYMAS
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目的:1.本实验通过观察养阴健脾散毒方水提物对胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡、周期等方面的影响并检测中药干预后细胞内的AKT信号通路及相关蛋白表达水平。比较Ⅰ号方及Ⅱ号方对于胃癌细胞的影响,研究此方治疗晚期胃癌的分子信号通路机制,论述其科学的理论依据,总结其治疗特色,为优化中医药治疗、临床实践应用提供依据。2.探讨蜈蚣、白扁豆在方中对于胃癌SGC-7901细胞的影响,以期为临床提供依据。方法:实验研究:制备养阴健脾散毒方(Ⅰ号方、Ⅱ号方)水提物,细胞培养箱培养胃癌SGC-7901细胞,通过CCK8实验检测Ⅰ号方、Ⅱ号方水提物对胃癌SGC-7901细胞的增殖水平影响,Transwell小室迁移法检测细胞侵袭迁移能力,流式Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平,WB实验检测养阴健脾散毒方提取物作用后SGC-7901内的akt、p-akt、Bcl-2、Bax这四个蛋白的表达量。结果:1.CCK8实验结果显示:随着实验组(Ⅰ号方、Ⅱ号方)药物浓度的升高(1%、2%、3%、4%、5%)及时间的延长(24h、48h、72h),胃癌细胞的增殖抑制率逐渐增加,与对照组相比,有显著统计学意义(P<0.01)。经SPSS 26.0计算,用药时间为48h时,ICI=1.543%,ICn=4.953%;2.Transwell实验结果显示:与对照组相比,具有显著的统计学意义(P<0.01),实验组(Ⅰ号方、Ⅱ号方)能够抑制SGC-7901细胞的迁移及侵袭能力,与时间和浓度呈正相关关系;3.流式Annexin V-FITC/PI双染法结果显示:实验组(Ⅰ号方、Ⅱ号方)作用下胃癌SGC-7901细胞48h后,胃癌SGC-7901细胞的凋亡率明显升高,且呈浓度依赖性;4..Western Blot结果显示:与对照组比较,实验组(Ⅰ号方、Ⅱ号方)的akt、p-akt、Bcl-2的表达量下降,而Bax的表达量上升(P<0.05)。结论:养阴健脾散毒方可以抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移侵袭的能力,并诱导其凋亡,其抗肿瘤机制可能与其干预akt、p-akt、Bax、Bcl-2蛋白水平的表达相关。
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