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文章从以下两部分就反复授精失败患者NK细胞的周期变化及内膜轻创术对其影响的研究进行了综述。 第一部分反复授精失败患者外周血和子宫内膜NK细胞的周期性变化及相关性研究 目的：探讨反复供精人工授精(Artificial insemination with donor sperm,AID)失败患者外周和子宫内膜自然杀伤(Natural killer,NK)细胞的周期性变化及二者间的相关性。 方法：以三个周期以上反复AID失败妇女为研究对象(n=34例),在同一月经周期的增生期(9～11天)和/或分泌期(19～23天)分别收集外周血和子宫内膜组织。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC);采用化学酶消化和密度梯度离心法获取子宫单个核细胞(Uterine mononuclear cells,UMC)。以抗CD3、CD56和CD16的单克隆荧光抗体为标记,采用流式细胞术检测外周血及子宫内膜组织中NK细胞亚群的百分比;采用Pearson或Spearman方法分析外周血与子宫内膜中NK细胞亚群水平的相关性。结果与增生期相比,反复授精失败妇女分泌期的外周NK细胞各亚群百分比无明显变化(P>0.05);子宫内膜中CD3-CD56+与CD3-CD56brightCD16-NK亚群细胞百分比在分泌期明显降低(P<0.01),CD3-CD56dimCD16+NK细胞亚群百分比无明显差异(P>0.05)。增生期外周血与子宫内膜NK细胞各亚群间无明显的相关性(P>0.05);分泌期内膜中仅CD3-CD56dimCD16+NK细胞百分比与外周血中CD3-CD56+,CD3-CD56dimCD16+及CD3-CD56brightCD16-NK细胞亚群间呈正相关(r=0.700,P<0.01;r=0.560,P<0.01;r=0.409,P<0.05)。 结论：反复AID失败患者外周NK细胞各亚群不具有月经周期依赖性;而子宫内膜NK细胞亚群呈现明显的周期性变化。外周NK细胞不能反映内膜总体NK细胞的变化情况。 第二部分子宫内膜轻创术对反复授精失败患者授精结局的影响及机制研究 目的：探讨子宫内膜轻创术对反复AID失败患者继续治疗的临床结局影响及可能机制。 方法：以三次以上反复AID失败妇女为治疗组(n=21例),在其接受AID治疗前一个月经周期的增生期(9～11天)和分泌期(19～23天)分别行两次子宫内膜轻创术;同期未行子宫内膜轻创术的同等条件妇女作为对照组(n=45例)。随访授精结局,比较两组间的临床妊娠率。同时,收集治疗组所有对象增生期及分泌期的外周血和子宫内膜,采用流式细胞术检测NK细胞各亚群的百分比。 结果：与对照组相比,治疗组对象授精后的妊娠率明显升高(38.10％vs.20.00％, P<0.05)。治疗组中第Ⅳ和Ⅴ授精周期患者的妊娠率,与对照组同等条件患者相比明显增高(53.85％vs.27.27％;P<0.01);与治疗组Ⅴ周期以上患者相比亦明显提高(53.85％vs.12.50％;P<0.01)。对治疗组妊娠和非妊娠患者增生期和分泌期的外周与内膜NK细胞各亚群百分比进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论：子宫内膜轻创术可以提高反复AID失败患者的临床妊娠率;第Ⅳ和Ⅴ授精周期前行轻创治疗效果可能更佳;NK细胞可能未参与其治疗机制。