背景:据世界卫生组织统计,癌症居各类常见死因的前列,而乳腺癌又是人类最常见的恶性肿瘤之一。近年来乳腺癌的发病率呈上升趋势,且临床治愈率不高,寻找有效杀伤乳腺癌细胞的化疗药物及其增效剂将是癌症工作者当前的主要任务之一。卡莫司汀(BCNU)是临床应用比较广泛的一类抗癌药物,我们的研究发现它对体外培养的小鼠乳腺癌C127细胞有很明显的抑制作用。6-苄基鸟嘌呤(O~6-BG)是烷化剂的增效剂,可以增强肿瘤细胞对BCNU的敏感性,使其更有效的杀伤癌细胞。最近,有研究者发现四唑紫罗兰(TV)能非常有效的抑制多种肿瘤细胞生长,同时可以增加肿瘤细胞对BCNU的敏感性,但是其功能和作用机制仍需要进一步研究。很多化疗药物是通过影响肿瘤细胞周期和诱导细胞凋亡来达到抑制肿瘤细胞增殖的目的的,增效剂则可以通过不同方式增强这种作用,此类研究可以为肿瘤生物学及肿瘤化疗提供一些理论依据。 目的:观察新型抗癌药物TV、传统抗癌药物BCNU和增效剂O~6-BG的单独或联合作用时,对体外培养的小鼠乳腺癌细胞系C-127生长抑制作用及其作用机制,以期在细胞水平上为治疗乳腺癌提供相关的理论依据。 方法: 对C-127体外增殖的影响:采用形态学观察、台盼蓝染色法、MTT法检测不同药物浓度作用下,C127细胞形态及细胞存活率的变化; 对C-127细胞凋亡的影响:用Hoechst33258染色法,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化和凋亡小体的出现;通过测定培养液中LDH的含量来检测细胞膜完整性; p53蛋白表达测定:免疫荧光结合激光共聚焦扫描显微技术测定细胞中p53的表达情况; 对细胞周期的影响:流式细胞术测定体外培养的C-127细胞在不同药物处理之后细胞周期的变化; 谷胱甘肽硫转移酶的活性检测:将不同药物处理过的细胞用超声波破碎后测定其GSTs的含量。