组织芯片结合免疫组化研究人胃癌Galectin-3和VEGF的表达及其临床意义

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目的:应用组织芯片技术结合免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶法( Streptavidin Peroxidase , SP )探讨胃癌组织中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)和血管内皮生长因子蛋白(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及其临床意义,以及它们与胃癌临床病理特征之间的关系,进一步探讨它们之间的相关性及两者与胃癌侵袭转移和预后的关系。方法:101例胃癌组织标本为2003年1月到2004年6月间南昌大学第二附属医院胃癌根治术手术切除标本,术前均未行放疗和化疗,术后病理诊断为胃癌,并记录其完整的临床病理资料。TNM分期:ⅠA期6例,ⅠB期7例,Ⅱ期19例,ⅢA期31例,ⅢB期18例,Ⅳ期20例。另取20例距肿瘤边缘5cm以上正常胃黏膜组织做对照。采用组织芯片技术建立101例胃癌组织及20例正常胃黏膜组织的组织芯片,每张组织芯片上有20-25个样本,以4×5或5×5组织微阵列排列,外形为圆形或类圆形。对组织芯片蜡块进行4μm厚连续切片,每10张切片取1张进行HE染色以鉴别组织学类型是否仍具有代表性,并且采用免疫组织化学SP法检测Galectin-3和VEGF蛋白在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达。用SPSS17.0统计软件包进行统计分析,以p值为0.05作为具有统计学意义的标准。结果:1本实验制备组织芯片蜡块5块,结果显示在全部深约3mm的阵列蜡块里,几乎所有标本均能保持它们的组织学类型特征,较少出现皱褶和掉片现象。2 Galectin-3阳性颗粒在细胞核、细胞质都有表达,主要表达于细胞质;胃癌组织中Galectin-3的阳性表达率为85.1%(86/101),明显高于正常胃黏膜组织35.0%(7/20)(p<0.05)。Galectin-3在胃癌中的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移和远处转移以及临床分期明显相关(p<0.05),而与患者年龄、性别、分化程度无显著性意义(p>0.05)。3 VEGF阳性颗粒主要表达于细胞质,少数表达于细胞核。胃癌组织中VEGF的阳性表达率为76.2%(77/101),明显高于正常胃黏膜组织25.0%(5/20)(p<0.05)。VEGF在胃癌中的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移和远处转移以及临床分期明显相关(p<0.05),与患者年龄、性别、分化程度无显著性意义(p>0.05)。4 Spearman相关性检验显示,Galectin-3和VEGF之间存在显著性关系。r′s=0.4843,p<0.05,提示二者之间呈正相关。5 101例胃癌患者因客观原因失访12例,随访到89例,于5年内复发转移47例,死亡36例,胃癌组织中Galectin-3阳性表达率为97.2%(35/36),明显高于生存期大于5年者77.4%(41/53)(p<0.05);VEGF阳性表达率为94.4%(34/36),明显高于生存期大于5年者79.2%(42/53)((p<0.05)。提示胃癌组织中Galectin-3和VEGF阳性表达患者,在5年内复发、转移者居多,生存期大于5年者少。结论:1组织芯片具有高通量、多样本、省时省力、降低误差、便于设计实验对照、可与其他多种生物技术相结合等多种优点,在肿瘤早期诊断,疗效判断及预后预测的分子标志物筛选方面有重大的实用价值和应用前景。2 Galectin-3与VEGF蛋白的表达与胃癌的侵袭生长和转移有显著相关性。3 Galectin-3与VEGF蛋白在胃癌中的表达呈正相关,但二者相互作用的机制尚未完全清楚,需做进一步研究。4对Galectin-3和VEGF蛋白表达的检测将加深对胃癌转移的理解,对胃癌诊治水平的提高和患者预后的判断有重大意义。
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